干细胞无血清培养基的成分组成(无血清培养对细胞的影响)
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细胞培养中一定要用血清吗
动物血清在细胞培养中提供细胞增殖所需的生长因子、激素、转移蛋白、贴壁和铺展在培养基质上的因子、蛋白酶抑制剂和其他免疫细胞冻存液如何存储营养物质。使用血清的优点是血清含有促进细胞增殖和维持的大部分因子,它几乎是通用的生长添加物,适用于动物、人和昆虫细胞等的细胞培养。因而使用血清不需要为每一个细胞系优化培养基,节省了免疫细胞存储公司大量时间和精力。在无血清培养基出现之前,血清被广泛用于细胞培养达几十年之久。
无血清培养基取代含血清的培养基已成为未来细胞培养的趋势。然而无血清培养基也存在着一些劣势。无血清培养基目前价格偏高,另外,一般无血清培养基通用性不高,不同类型的细胞株或细胞系可能需要不同的添加成分。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。
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如何用NGF诱导PC12细胞分化
诱导性多能干细胞(iPSCs)在早期,用滋养层细胞、胎牛血清FBS等早期传统方法培养,无法培养出永生化细胞,培养一段时间后,诱导性多能干细胞(iPSCs)就开始分化为各种其他细胞。随着无血清培养基技术的不断发展与进步,现在有专门针对诱导性多能干细胞(iPSCs)的BeYaMA 1无血清培养基,BeYaMA 1人多能干细胞无血清培养基是为人胚胎干细胞(ESCs)和人诱导多能干细胞(iPSCs)量身定制的无血清培养基,产品成分明确、无需滋养层细胞,可在长期传代培养过程中良好的维持人胚胎干细胞(ESCs)和人诱导多能干细胞(iPSCs)的良好的细胞形态、多能性和稳定性。产品质量越优质的无血清培养基越容易让诱导性多能干细胞(iPSCs)形成永生化细胞。
胚胎干细胞的培养基属于什么培养基
胚胎干细胞培养基的发展历程为传统培养基加血清-条件培养基-无血清培养基,最高级别的无血清培养基是性能最优的培养基,批次稳定、成分明确,主要厂家有HY
StemCell,invitrogen,stemcell等;
外周血详细资料大全
外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞 ,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计画中首次提出外周血这一新概念。
基本介绍
中文名 :外周血 外文名 : peripheral blood 含义 :骨髓之外的血液 含量 :0.01% 基本介绍,培养基配制,配制用水,培养基,血清,抗菌素,植物血凝素, 基本介绍 [英] peripheral blood 正常人外周血中一般看不见幼稚的干细胞的,只存在有极少量的造血干细胞,其含量为0.01%左右。如果幼稚细胞的比例大幅增加,有可能是类白血病。正因为存在0.01%的造血干细胞,可利用细胞分离的技术(血细胞自动分离机),将外周血中含有造血干细胞的单个核细胞进行分离保存,重复数次达一定细胞数量后,回输给患者以之代替骨髓而进行的干细胞移植,称为外周血干细胞移植。 培养基配制 配制用水 培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的 双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 培养基 培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2~7.4,若pH值超 过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。 血清 培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰柜存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。 抗菌素 为防止培养时期细菌的污染,可在培养基中添加适当抗菌素,一般用量与组织细胞培养相同:卡那霉素100单位/毫升,或双抗--青霉素100单位/ 毫升,链霉素100微克/毫升。 植物血凝素 非增殖期的细胞不能制备染色体,如人外周血淋巴细胞,但在离体培养过程中,在PHA的作用下,可被 *** 转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。 经实验测定其分裂高峰分别于培养后44—48小时和68—72小时。 PHA有粘多糖,蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂,蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加,直至全部免疫活性细胞均 被激活为止,但PHA浓度过高会引起凝集,一般采用4%浓度为好。
培养脂肪干细胞一定要用无血清培养基吗
不一定要无血清培养基培养。
无血清培养的目的只是适合将来临床使用或者排除其他不确定成分因子影响基础研究的判断。你妠瓷兰干细胞美容护肤品可以用含10%FBSDMEM:F12培养基培养好原代(0.1%gelatin包被,I型胶原酶至少消化40min以上),然后使用Sciencell的MSCM进行培养,效果还不错。
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