外泌体会议2021（2021外泌体与疾病研讨会）

本文目录一览：

• 1、外泌体提取策略
• 2、什么是NK细胞外泌体？
• 3、运动不当造成软骨损伤，干细胞可帮忙修复
• 4、2021-03-03 基于lncRNA的功能富集分析——lncSEA
• 5、外泌体添加化妆品里是多少单位？
• 6、地震最受益的股票

外泌体提取策略

外泌体即细胞外囊泡（简孙纳卜称EVs）是所有细胞主动分泌的纳米级囊泡,活细胞释放不同类型的细胞外囊泡进入细胞外环境进行细胞间交流,细胞外囊泡越来越多地被认为是有希望的液体活检生物学标志物｡根据相似囊泡的直径大小可将细胞外囊泡分为三类,直径在50-150nm的外泌体,直径在100-1000nm的微囊泡､外粒体和微颗粒,直径在-100-5000nm的凋亡小体｡目前主要认为,外泌体产生的过程是细胞膜内陷形成内体,再形成多泡体,多泡体与质膜融合导致其管腔内囊泡释放到细胞外,产生一种称为外泌体的EV亚型｡

2 外泌体的提取纯化方法

2.1 基于密度的分离方法

2.1.1 超速离心法

超速离心法是最常用的外泌体提取方法,首先,施加较低速度的离心力300g以从细胞培养液中去除细胞;然后,对上清液施加较大的离心力(10000-20000g),去除大的细胞碎片和破碎的细胞器;最后,再次进行高速(100000-150000g)离心从 上清液 中收集外泌体,所有离心在4℃下进行｡超速离心法获得的外泌体不被分离试剂污染,且分离数量多,处理样本小｡尽管超速离心法是提取外泌体最广泛的“金标准”,但仍然有很多缺点,如所需的超高速离心仪器比较昂贵､样品量大､耗时长､电镜观察外泌体时仍存在蛋白质污染｡

2.1.2 蔗糖密度梯度离心法

目前已发现,外泌体在蔗糖梯度为1.15-1.19g/mL密度中漂浮,所以根据这个特性,可以将样品与蔗糖梯度溶液一起超速离心,外泌体沉降到不同的密度区域就可以将其区分出来｡蔗糖密度梯度离心法需要预先配好连续梯度浓度的蔗糖溶液,将蔗糖溶液铺于离心管底部,再将样本放于上部,4℃下100000g超速离心｡蔗糖密度梯度离心法获得的外泌体纯度较高,但是前期准备复杂,耗时长,又不能完全将外泌体与蛋白质分离开｡2013年10月ISEV会议一些研究人员表示,通过蔗糖密度梯度离心法分离囊泡时,细胞囊泡的生物功能丧失｡

2.2 沉淀法

2.2.1  聚乙二醇 (PEG)

PEG 是一种水溶性非离子化合物,具有极强的亲水性,可以与疏水的脂质双分子层结合,从而改变外泌体的溶解度而使外泌体沉淀｡RIDER等研究发现,PEG水平会影响外泌体的产率,且从外泌体中获得的总蛋白和RNA在数量和质量上足以用于蛋白质组学和测序分析｡沉淀法操作简单,不需要特殊设备,更经济,外泌体产量高,但是会沉淀一些非外泌体的疏水性物质而导致外泌体纯度不够｡

2.2.2 试剂盒法

最近已经开发出基于聚合物共沉淀的试剂盒,如ExoQuick､TEI等,可用于提取多种体液中的外泌体｡聚合物沉淀剂ExoQuick与样品4℃共孵育30min,然后室温1500g离心30min,即可获得外泌体沉淀｡与超速离心法比较,试剂盒法更简便､耗时短,且能获得更高的外泌体产量｡试剂盒法获得外泌体沉淀含有的杂质较多,不同来源的样本需要使用不同的试剂盒来进行提取,且试剂盒价格较贵｡

2.3 基于大小的分离方法

2.3.1 SEC SEC

主要根据外泌体的大小对外泌体进行分离和纯化｡样品中大分子物质不能进入凝胶孔而被流动相快速洗脱出来,尺寸小于孔径的物质可进入多孔材料,需要较长时间被洗脱出来,即可通过不同的洗脱时间分离外泌体｡BING等证明了琼脂糖凝胶可以从无血小板上清液中纯化出外泌体,通过这种方法茄吵,外泌体很容易从蛋白质和高密度脂蛋白中分离出来｡HONG等通过改编和使用mini-SEC方法能够有效分离出外泌体,与漫长而复杂的超速离心法不同,它可在30min内完成外泌体分离｡通过SEC分离的外泌体纯度较高,分离出结构上完整且功能活跃的囊泡是基于微型SEC分离的重要优势,但数量较少,而且需要特殊设备,故应用不广泛｡

2.3.2超滤法

超滤法是根据外泌体的大小使用相应孔径的滤膜,将样品中小分子物质过滤到膜的另一侧,而将大分子物质滞留在膜上来达到分离的目的｡超虑法简单､省时､成本低｡LIU等改则穗良了简单的超滤法,通过将不同孔径的膜(200､100､80､50､30nm)串联在一起,实现了不同大小外泌体的快速分离,且捕获效率明显高于超速离心法｡然而,过滤器很容易被囊泡和其他大分子物质堵塞,这种情况很容易导致膜压力过大而破碎｡

2.4 基于表面成分亲和力的分离法

2.4.1 蛋白质

外泌体表面含有丰富的蛋白质,所以基于其表面成分的亲和力特别适合于分离外泌体｡CD63是外泌体中发现的最丰富的蛋白质之一,因此,常用抗CD63免疫吸附外泌体｡ZHAO等通过使用抗CD63包裹的磁珠与血液样品不断混合,将外泌体捕获到磁珠上后,加 缓冲液 冲洗5min,然后引入3种不同荧光染料标记的抗体[抗CD24､抗上皮细胞黏附分子(抗EpCAM)､抗糖类抗原-125(抗CA-125)],通过观察不同荧光强度可以量化卵巢癌中不同肿瘤标志物的表达水平｡

2.4.2 膜磷脂

虽然大部分基于表面成分的亲和方法是基于外泌体表面的蛋白质,但是脂质双层也是一种很好的检测目标｡XU等利用外泌体膜上表达的磷脂酰 丝氨酸 (PS)可以被PS结合受体Tim4很好地结合,用Tim4固定化的磁珠与样品反应进行外泌体捕获,并且观察到洗脱的外泌体保持着完整的形态,与商业外泌体提取试剂盒相比,表现出更高的捕获率｡CHEN等利用外泌体将带负电荷的PS暴露在膜上的特点,使用带正电荷基团的离子交换树脂的磁珠与血浆样品反应,血浆中的外泌体就能与磁珠结合,通过这种方法分离的外泌体具有比超速离心法更高的回收率和更少的杂质蛋白｡

2.5   ACE分离法

ACE微阵列产生的介电泳(DEP)分离力是通过施加交流电场产生的,纳米级的粒子和其他纳米级实体物质被吸引到圆形微电极边缘周围的DEP高场区域,细胞和大的实体物质被吸引到DEP低场区域｡ IBS EN等的ACE装置需要30-50μL血浆样品就能够在15min内将外泌体浓缩到微电极周围的高场区域｡ACE设备流程明显快于目前使用的方法,这个装置简化了外泌体提取和回收过程的能力,明显减少了加工步骤和消耗时间｡CHEN等构建了具有交叉电极的DEP芯片,能在30min内从血浆样品中分离出外泌体｡经过测试证明,DEP芯片具有高捕获率和高回收率,需要的时间更短,并且不需要笨重和贵重的仪器｡

2.6 微流控芯片法

微流控芯片法是新开发出来的用于快速高效分离样品中外泌体的方法｡WOO等使用2个纳米过滤器(Exodisc)集成的实验盘在30min内实现了20-600nm外泌体的全自动富集｡使用纳米粒子跟踪分析定量检测证实了细胞培养上清液中外泌体的回收率大于95%｡与超速离心法相比,Exodisc提供了高出100倍的mRNA水平,更省时,所需样本量更少｡FANG等开发了一种微流体芯片,将包裹了抗CD63的磁珠与血浆样品通入芯片,在第1个腔室中捕获到外泌体,通入一抗与磁珠-外泌体混合物结合,再通入荧光标记的二抗形成磁珠-外泌体-一抗-二抗混合物聚集在第2个腔室｡微流控芯片法操作简单,捕获率高,特别适合于生物学研究｡外泌体作为癌症诊断的有前景的生物学标志物,其在癌症的液体 活检 中受到关注｡外泌体的生物学价值和临床应用价值凸显了开发有效提取和分离外泌体技术的重要性和必要性｡相信随着技术的不断进步和创新,外泌体提取将变得更加简便经济,纯度越来越高,完整性越来越好｡

提取后往往需要进一步检测，确定提取的是不是外泌体。有三种方法：1. 扫描电镜观察；2. NTA仪器粒径检测；3. WB检测。如图所示，在外泌体上往往存在许多标志物，这时候就可以选择相应的抗体进行WB检测。根据22 篇外泌体相关文献的统计，排在前4 位的检测指标为 CD63（13/22）、Tsg101(8/22)、CD9 和CD81并列第三位（6/22）；接着检测较多的4 个指标为Alix （4/22）、HSP70(3/22)、flotillin (3/22)和Syntenin (2/22)；此外还有一些指标仅在1 篇文献中出现过，例如HSP90、LAMP2B、LMP1、ADAM10、nicastrin、AChE、AQP2、RPL5、a-1AT。针对外泌体的定性检测至少选择两个指标就能满足文章发表需要了，比如检测CD63 和Tsg101。 

什么是NK细胞外泌体？

世界上有成千上万种不同的疾病，不过所有的疾病都可以归因于身体细胞功能出现了故障。 健康并不是一种偶然，而是一种选择 ，我们每个人都可以选择健康！

糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病，是现代社会典型的“富贵病”之一。 Ⅱ型糖尿病(T2DM) 的病理相对I型糖尿病更为复杂，主要是胰岛β细胞功能障碍和不同程度的胰岛素抵抗，导致无法维持血糖稳态。典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即 “三多一少"症状 ，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害和功能障碍，最终可能发展为慢性并发症。

1、 II型糖尿病与胰岛素抵抗

现代社会物质极大丰富，各种美食不停刺激我们的味蕾，很少有小伙伴能抵挡美食的诱惑。然而随之而来的是 肥胖症 的发病率迅速升高，据统计，中迅搏国已成为肥胖人口最多的国家。而 肥胖则是Ⅱ型糖尿病的重要危险因素 。体内过多脂肪导致的游离脂肪酸会引起胰岛素抵抗，使脂肪细胞、肌肉细胞和肝细胞对胰岛素的敏感性降低，并导致胰岛素信号传导失调和葡萄糖、脂肪和蛋白质的代谢紊乱 ； 随之而来的高血糖症又促使胰腺不得不分泌更多胰岛素，导致高胰岛素血症。这些因素叠加起来，最终可能导致Ⅱ型糖尿病的发生。

2、 NK细胞与胰岛素抵抗的关系

胰岛 素抵 抗 是由肥胖所引发的严重的并发症，最终会导致Ⅱ型糖尿病。肥胖引起胰岛素抵抗的一个重要原因是起源于内脏脂肪组织（visceraladiposetissue,VAT）的慢性系统性炎症。VAT炎症与促进炎症巨噬细胞在脂肪组织的积累相关，但是诱发巨噬细胞积累的免疫信号仍然未知。

来自克罗地亚里耶卡大学的研究团队发现脂肪组织内的不同表型的自然杀伤细胞（naturalkiller,NK）在肥胖应激及胰岛素抵抗过程中发挥着重要作用。研究人员对两组实验小鼠分别给与普通饮食和高脂肪饮食，发现高脂肪的饮食组的脂肪组亩歼祥织里有NK和干扰素γ（Interferon-γ,IFN-γ）的产生，这表明 NK在肥 胖引发的 脂肪应激和VAT炎症之间存在着关键的联系 。

研究结果表明：肥胖引起脂肪细胞中NK细胞激活受体1（NKcell-activatingreceptor1,NCR1）的配体上调；这刺激NK细胞增殖，刺激IFN-γ产生，进而引起促炎巨噬细胞的分化，产生胰岛素抵抗。NK细胞缺失改掘，NCR1或者IFN-γ能阻止促炎巨噬细胞在VAT的积累，这会大大改善胰岛素敏感。

因此NK细胞是在响应肥胖引起的脂肪应激过程中巨噬细胞分化和胰岛素抵抗的 关键调控子 。此项研究提供了重要的理论依据，证明脂肪组织中的NK细胞及巨噬细胞，可作为治疗代谢综合症病人，及 降低Ⅱ型糖尿病进展风险的新靶点 。

3、 NK细胞外泌体：潜在新策略

自然杀伤(NK)细胞 被认为通过调节全身炎症与Ⅱ型糖尿病相关。然而，NK细胞调节胰岛素敏感性的机制仍然未知。

2021年11月30日，中国药科大学徐寒梅团队在SignalTransductionandTargetedTherapy（IF=18.19）在线发表题为“Naturalkillercell-derivedexosomalmiR-1249-3pattenuatesinsulinresistanceandinflammationinmousemodelsoftype2diabetes”的研究论文，该研究发现来自 瘦小鼠的NK衍生外泌体减轻了肥胖诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠的胰岛素抵抗和炎症。此外，瘦NK衍生的外泌体可增强胰岛素敏感性并缓解脂肪细胞和肝细胞的炎症 。MiR-1249-3p在瘦NK衍生的外泌体中显著上调，可以通过外泌体从NK细胞转移到脂肪细胞和肝细胞。 NK衍生的外泌体miR-1249-3p显著诱导细胞胰岛素敏感性并缓解炎症 。

从机制上讲，外泌体miR-1249-3p直接靶向SKOR1以调节三元复合物SMAD6/MYD88/SMURF1的形成，其通过抑制TLR4/NF-κB信号通路介导葡萄糖稳态。该研究揭示了NK衍生的外泌体miR-1249-3p在缓解胰岛素抵抗中的新作用，并为Ⅱ型糖尿病提供了一系列潜在的治疗靶点。

Ⅱ型糖尿病是代谢性糖尿病的最常见形式，特征是 高血糖（也称为高血糖症）和胰岛素抵抗 。遵循高脂肪饮食的个体特别容易患肥胖症，这显然是人类胰岛素抵抗的最常见原因。胰岛素抵抗的症状包括脂肪细胞、肌肉细胞和肝细胞对胰岛素的敏感性降低，以及失调的胰岛素信号和葡萄糖、脂肪和蛋白质的代谢紊乱，最终导致Ⅱ型糖尿病的平行上升。Ⅱ型糖尿病患者总是伴随着亚临床全身性低度炎症反应和脂肪组织、肝脏、胰岛、下丘脑、心脏组织和其他组织的功能障碍，最终发展为慢性并发症。

先前的研究表明， 免疫系统调节全身的代谢器官 。各种免疫细胞，如T细胞、B细胞、巨噬细胞和NK细胞，在Ⅱ型糖尿病中起着至关重要的作用。肥胖诱导炎症，其特征是巨噬细胞浸润增加，并与巨噬细胞群从抗炎M2巨噬细胞转变为促炎M1巨噬细胞相关，在很大程度上导致肥胖引起的胰岛素抵抗。 NK细胞和巨噬细胞可以合作调节炎症 。此外，脂肪细胞上调肥胖中NK细胞激活受体(NCR1)的配体，这会触发NK细胞的增殖。事实上，NK细胞在肥胖诱导的炎症和胰岛素抵抗中起着关键作用。然而，NK细胞在肥胖引起的炎症中的作用和机制尚不清楚。 

外泌体是直径约30-150nm的囊泡状体 ，是细胞内体膜向内出芽形成的多囊泡，与细胞膜融合后释放到细胞外环境中。外泌体由各种类型的细胞产生，并通过运输信息货物作为细胞间通讯的介质，例如蛋白质、脂质和RNA（miRNA、mRNA、lncRNA和circRNA），在外泌体中稳定并转移。此外，外泌体可以由胰岛β细胞、干细胞和胰岛素敏感组织分泌，然后转移到代谢器官、免疫细胞和内皮细胞以维持葡萄糖稳态或通过免疫反应、氧化应激和血管生成加重胰岛素抵抗。然而，脾脏NK细胞衍生的外泌体在Ⅱ型糖尿病的发生和发展中的参与尚不清楚。

NK细胞通过控制炎症因子的释放在小鼠体内发挥抗抑郁样作用。 NK细胞衍生的外泌体miR-207减少促炎细胞因子（IL-1β、IL-6和TNF-α)的释放并减轻小鼠的抑郁样症状 。在这项研究中，揭示了 NK衍生的外泌体在缓解胰岛素抵抗中的新作用，并为Ⅱ型糖尿病提供了潜在的治疗靶点 。

运动不当造成软骨损伤，干细胞可帮忙修复

春天到了，“穿衣显胖脱衣更胖的季节”猝不及防的又近了一步。“不瘦十斤，不换头像”的flag一夜间在数据星球中漫天飞舞，迷人眼，乱人心。

“减肥”到底是动词还是名词，已经模糊到它自己也搞不清……它的能指与所指每到春天就会迎来一场迷茫，而大部分朋友选择了它的“名词”形态，一边念在嘴边上，一边静待啤酒与撸串齐飞的夏天。

当然，不是所有的人都把“减肥”当名词，杨树旁、柳树下，运动场、健身房……立志把“减肥”当动词的朋友早早就来到了自己喜爱的位置上。跑步、跳绳简单易行场地不局限，微风拂面神清气爽；健身房铁块举到起飞，深蹲到地心引力都自叹不如，大汗淋漓酸爽无比……

然而，如同机器一旦开机工作老判就会发生磨损，是运动都会有不同程度的损伤，而包括减肥在内各种目的运动带来的磨损，最明显的影响位置就是肢体。

软骨损伤，阻碍迈进健康生活的门槛？

人体中的 关节软骨覆盖在关节表面上，能够承受一定的压力，并减少摩擦塌含举， 可以有效地维持关节的正常功能和运动【1】。而跑步跳绳这类常见运动，就是以膝关节为承重进行重复动作，如果核心力量不好、姿势不正确或运动时间过长，就容易让膝盖软骨承受不堪的压力。

因此关节软骨损伤成为了临床常见的运动损伤【2】。2019年，关节软骨损伤作为运动医学名词被公布，其确切的定义为： 由急性创伤或慢性劳损导致的关节软骨的破坏。 可见，此类损伤已具有了普遍的关注性【3】。如此一来，似乎可以听到把“减肥”当成名词的小伙伴如释重负的声音——“原来运动容易造成软骨损伤，还是躺平更安全！“

嗯，说的对，但不完全对团碧。

软骨损伤，关节炎的“序章”

先说说对的地方。以我们上述提到的关节软骨为例， 关节软骨缺乏血管、神经支配，损伤后难以完成自身的再生修复，而缺乏有效的治疗会导致骨关节炎（OA）的发生 【4】。

而骨关节炎作为一种非炎性关节病，主要特征为关节软骨破坏及骨赘形成，具体表现为关节疼痛、僵硬，日常活动受限，不仅致残率高达53%，且会增加心血管事件的发生率及全因病死率【5】。我国一项关于骨关节炎的“十五”攻关计划项目表明： 全国40岁以上人群原发性骨关节炎患病率约为46.3%，男性患病率约为41.6%，女性患病率约为50.4% 【6】。

这下厉害了，四舍五入，不当的运动容易导致软骨损伤，而这种损伤不可逆亦不可治愈，还有望“喜提”关节炎，从而走向心脑血管疾病的怀抱……如此一来，提出“生命在于运动”的伏尔泰叩响的体育哲学的大门，难道要打算关闭吗？

答案当然是否定的，体育哲学首先不答应。体育哲学就是要从宏观上研究体育的基本问题和矛盾关系，揭示体育深层次本质及其辩证发展规律【7】，所以，生命在于运动，是在于合理的量化、因人而异的计划以及量力而行的平衡。

除此之外，医学不答应，在以手术、药物为主要治疗手段的漫长时空里，医学界不断探求着软骨疾病的治疗方式—— 主要采用口服非甾体抗炎药缓解疼痛，平日以物理辅助缓解关节受累，必要时进行外科手术。

药物与手术治疗的探索固然努力过，但总结起来主要以缓解症状为主，并不能阻止软骨损伤以及骨关节炎的进展【8】，也不能让其拥有完全治愈的可能。但探索不能停摆也不会停摆，“生命在于运动”包含着无限的人类哲思，因为人的生命之初，本就是努力运动的细胞。因此，以干细胞为代表的再生医学不会答应谁来质疑这句古老的哲思，当然，干细胞也有足够的实力来捍卫。

干细胞拿捏软骨损伤，拒绝关节炎

骨关节炎，归根结底是 由于软骨细胞自我修复能力差，导致软骨受损钙化，软骨下骨形成导致的 【9】。所以，逆转关节软骨退变的过程，才是治愈的关键，也是拿捏软骨损伤恶化成骨关节炎的方法。

而这“逆转魔法”，只有干细胞会。干细胞因为拥有再生各种组织器官的功能，又被称为“万用细胞”，理论上，它“逆转重生”的功能，可以治愈一切疾病。在治疗软骨损伤方面， 干细胞应用自我更新、多向分化以及克隆形成等基本特征，可在软骨损伤微环境中，定向迁移并分化成表型稳定的软骨细胞， 为软骨损伤的治疗提供了一种新的思路，为软骨损伤修复带来了新的希望【10】。

而干细胞并非只有一类，在治疗软骨损伤方面，整个干细胞家族都在它们“神奇体质”的基础上，展现着其各自的本事。

广泛存在于脂肪，胎盘，脐带，牙髓，外周血及滑膜中的 间充质干细胞，可利用自我更新能力分化为多种中胚层谱系细胞， 如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞，心肌细胞和血管细胞等【11】。它来源广泛的特点，使其“家族”在治疗骨关节炎软骨损伤方面成果颇丰。

其中骨髓来源间充质干细胞被评为最具前景的干细胞来源之一，在骨、软骨修复中起着至关重要的作用，其 可从软骨下骨迁移到受损部位，分化为软骨细胞和成骨细胞的同时整合新生及周围组织，对软骨及软骨下骨组织进行修复， 不仅如此，它还可以 抑制局部炎症反应并减轻败血症 【12】。

而浑身是宝的干细胞，其外泌体也对修复软骨损伤起到了作用。外泌体是一种细胞外囊泡，携带大量活性物质， HAN等通过实验证实， 脂肪间充质干细胞可通过丰富的miRNA促进软骨修复、减轻炎性反应，保护关节软骨 【13】。

理论道路一片光明，在临床应用上，干细胞也给出了令人欣慰的答卷。一项对82例骨关节炎患者实施干细胞治疗的AB对照组试验表明，接受干细胞疗法的B组患者的总有效率90.24%，高于未接受的A组患者73.17%，可见 干细胞治疗骨关节炎临床效果显著 【14】，应用前景十分广阔。

所以，永远不要去质疑“生命在于运动”这句话，因为还有一句话叫“科学的科学是哲学”，哲学启迪人类寻找最朴素的理论来定义万物的本质，而干细胞引领的再生医学，也无疑在尊崇着这样的朴素思想——那一颗颗运动的细胞，它们给予人类生命，教会人类用其本真的特性消解最复杂的顽疾，也终将会引领人类，走向伟大的重生。

参考资料：

【1】曾伟,胡金玺,肖涛. 软骨源性形态发生蛋白-1与关节软骨修复研究现状[J]. 国际骨科学杂志,2007,(4):252-254.doi:10.3969/j.issn.1673-7083.2007.04.015

【2】【4】【10】曹瑞祺,尹合勇,于浩淼,马立峰,郭艾.软骨干/祖细胞修复软骨损伤的研究进展[J].中华损伤与修复杂志(电子版),2022,17(01):72-75.

【1】 关节软骨损伤/53303787?fr=aladdin

【5】【9】【13】费杨厚雪,张鸽,张云,黄炜.脂肪间充质干细胞治疗骨关节炎研究进展[J].中国药业,2021,30(23):116-120.

【6】腾讯网 《日本干细胞：膝骨关节炎治疗新希望—干细胞疗法》

【7】体育哲学

【8】百度 《临床研究新增研究成果，2项干细胞治疗骨关节炎的临床疗效观察》;wfr=spiderfor=pc

【11】【12】张爽,刘石,汪宇峰,吕婵,李保玲,王萍,丛军,朱志强.间充质干细胞修复骨关节炎软骨损伤的临床应用意义[J].中国组织工程研究,2018,22(33):5379-5385.

【14】搜狐网 《干细胞治疗骨关节炎的有效新方法》

图片来源于网络，侵删

2021-03-03 基于lncRNA的功能富集分析——lncSEA

        GO，KEGG，GSEA等久负盛名的功能富集分析方法对于解析各种基因的调控功能和互作网络起到非常重要的作用。但这些方法的一个很大或慧的局限性就是只能针对蛋白质编码进行进行分析。因此，对于像miRNA，lncRNA和circRNA等非编码RNA的功能预测与分析时就需要采取迂回战略，即通过靶向关系（例如miRNA靶向调控蛋白编码基因），共表达关系（例如非编码RNA与蛋白质编码基因的共表达情况）和基因座位关系（例如lncRNA附近的蛋白编码基因，circRNA的宿主蛋白基因）等将非编码RNA集转换为对应的编码RNA集，再此团知使用GO，KEGG，GSEA等工具进行功能富集分析。

        本研究则基于已有的lncRNA相关功能注释，开发了直接使用lncRNA进行功能富集的工具——lncSEA （ ）。

1. lncSEA整合18个lncRNA相关数据集，森消包括细胞标志物相关lncRNA，药物相关lncRNA，外泌体相关lncRNA，进化保守lncRNA，lncRNA亚细胞定位等；

2. 基于lncRNA一致的功能注释，lncSEA可以直接使用lncRNA进行功能富集分析；

3. lncSEA同时汇总了lncRNA转录调控相关数据，可以分析参与lncRNA转录调控的转录因子，超级增强子等反式和顺式调控因子。

Chen, J. et al. LncSEA: a platform for long non-coding RNA related sets and enrichment analysis. Nucleic Acids Res 49, D969-D980 (2021).

外泌体添加化妆品里是多少单位？

ml是体积单位，g是重量单位。

重量单位和体积单位的关系式为：质量=体积×密度。在不知道化妆品的密度的情况下，无法准确计算出质量。

以水的密度来看，1ml=1g，而大多液体护肤品以ml来计算，乳液、霜用g来计算，这是根据不同状态来区分的，所以化妆品会有ml和g两种单位。

9月21日下午，国家药监局于官网发布《化妆品标签管理办法（征求意见稿）》，消息甫出，业界哗然。其中争论的核心问题仍在于成分标注引发的功效宣称问题，这也是新《化妆品监督管理条例》（下称新《条例》）颁布带来的后遗症。

更多人认为，法规“意见稿”才是真正需要行业媒体表达声音的时候。《化妆品报》综合多位业内专家意见，帮助行业更好的理解法规最新动向。

1、微量添加等于概念性添加？

《办法》引发争议最多的是第12条关于微量成分标注的规定。

按照《办法》，“化妆品配方中存在含量不超过0.1%（w/w）的成分的，所有不超过0.1%（w/w）的成分应当以“其他微量成分”作为引导语引出另行进行标注，可不按照配方含量的降序列出。”

立刻就有人问，添加低于0.1%的成分就能起作用的化妆品怎么办？起到功效的成分还被列入了其他微量成分，这让品牌怎么宣传？

某原料公司的工程师告诉记者，从药品来讲，0.1%就能表达功效的成分是存在的，但在化妆品领域，对一般的美白、抗衰等功效而言，低于0.1%的含量就能起效的成分几乎没有。低于0.1%的添加还能发挥功效的，就只有防腐剂，它在低于0.1%的剂量下就可以起到防腐功效，但没有化妆品会去宣称自己的防腐功效。

对于业内盛传的 ppm级别（百万分之一）就能发挥化妆品功效的成分，该工程师运蠢告诉记者，他找不到这样的成分。但复配是个个例。他举例，化妆品的防晒或美白等功效通常需要通过多种防晒剂的组合添加方能奏效。以防晒为例，每个防晒剂都只有0.05%的含量，但这些成分复配起来，其总含量就超过了0.1%的可能性，但这些依然要被列在其他微量成分里。

除了复配的功效成分，被业界热议的主要是活性成分——在化妆品中，添加微量即能起到功效的成分主要是活性成分提取物。不过，在活性成分的添加含量之外，还有一个活性物的纯度问题。换言之，纯度和活性都会影响产品的功效。譬如许多日本的厂商将原料买回去后，都会进行二次处理，目的就是提纯，利用高纯度的活性成分提高产品功效。

有人认为，《办法》看起来更像是在鼓励企业购买低成本低纯度的活性成分。而那些添加了高纯度活性物的化妆品，却要被当做概念性化妆品加以打击。新《办法》似乎只强调了含量而未提及纯度，这一看法显然不够全面。实际上，今年8月推出的《化妆品注册与备案资料规范》（征求意见稿）和《化妆品新原料注册与备案资料规范》（征求意见稿），已经对化妆品原料和成分做出了详细的说明规定——要求化妆品企业在备案的时候，提交每个原料和成分的质量规格旁轿陪，也就是说，纯度问题在产品上市之前的注册和备案环节，就已经被“关照”到位。

对于一开始就奔着钻法规空子，利用低成本低纯度的成分，存心虚假宣传的品牌和企业来说，概念性添加的这扇门是严严实实地关上了，而对于真正想要认真做好品牌，拿真材实料严谨宣称的企业和品牌来说，新《办法》实际上是保护了他们。换言之，新《办法》对越规范的厂商越友好，尤其是本来就很注重法规不越界的品牌方。

更多人的理解是正面的——《办法》的主要作用是换种方式告诉大家不要乱来。拜尔斯道夫中国区企业事务及法务总经理雷开霆认为，为了一点点宣称，添加一点点的含量，其实难以保证功效，新的规定对于正规的企业是个好事情。“我想这也是监管部门从规范化妆品市场，让消费者拥有更多知情权、让品牌方真正做好产品的角度出发的吧。”

恩特科技总经理贾逸丹在接受记者采访时表示，“这需要行业上下共同对消费者进行教育，久而久之，消费者会明白，功效不取决于是否添加了某个成分，而是依据产品真实的功效验证。”贾逸丹认为，这将引导消费者去关注国家网站上公布的各个产品功效评价。

2、没有“偏向”进口品

反而增加了包材成本

有人说《办法》对进口品更友好，但也有人认为，《办法》实际上增加了进口品进入中国市场的成本。“标签的管理规定本身对国产和帆团进口就是基本一致的，特别是中文体现的部分，不存在偏袒哪一方。如果一定要说的话，反而进口品的外文原包装也在一定程度上受到了监管，相当于是要按照中国的标准来了，要求是变严了，这在‘起草说明’ 里也有提到。”

比如，《办法》规定，直接接触内容物的产品包装容器上必须有中文名及保质期限的相关规定，也会对进口产品在原包装方面提出要求。众所周知，许多进口化妆品并未在接触内容物的产品包装上印有中文名和保质期限，特别是欧洲的产品，瓶身上很对只有产品批号，既没有中文标签，也没有保质期限。如果按照新《办法》，许多进口化妆品的包装都得更换，而这对企业来说无疑增加了很多成本。

此外，《办法》对产品原包装提出的要求，预计会引发一定的贸易关注，但考虑到《办法》只是对上位法《条例》相关内容的细化，且国外也有类似的管理规定，在继续坚持的同时，需要进一步做好沟通解释工作。

实际上，2014年《标签管理办法》对外征求意见时，引发最多贸易关注的部分就是借鉴药品的规定，必须专为中国设计中文包装。新《条例》在起草的过程中，对此条款进行了修订，规定可以加贴中文，但外文原包装的内容必须与加贴的中文标签一致，此做法较过去比相对宽松，但中文与外文一致，也强制了国外原包装必须符合中国的法规要求。也就是说，从《条例》到《办法》，法规对进口产品的监管也是同步趋严的，甚至可以说，对进口产品提出了更大的挑战。

3、冰点监管之下

化妆品行业或迎“跨境”潮

洗牌是必然的。“你去看新法规里面有多少规定，光是备案资料规范就有81页，我都还没看完，更不用说所谓的化妆品不良反应监管机制将跟接下来的续证挂钩，对质量负责人也有明文的专业及从业年资要求。”王楠预测，《办法》推出后，很多只会营销而不是真正专注做产品的品牌，尤其是现在一堆所谓互联网品牌，会在新一波法规实施后遇到很大的麻烦，甚至被洗牌。

《办法》意见稿推出的第二天，一家电子商务公司的则招聘启事引发了法规专业人士王楠（化名）的注意。在这个护肤产品经理的招聘上，明确要求产品经理要熟悉欧美系或日系产品开发动向。王楠说，这家企业对风向把控的很准——标准的电子商务公司要做跨境的节奏。

“跨境电商属于个人自用，民众自行负担风险，化妆品法规再严跟我（跨境电商）没有关系。”王楠说，未来一到两年内，大批的化妆品互联网公司将转向海外代工、加入跨境电商大军。

他还向记者透露，从2021年1月1日起，新的《化妆品监督管理条例》正式实施之际，各项配套法规或将逐条分批实施。

地震最受益的股票

财经要闻

1、国务院常务会议审议通过“十四五”全民医疗保障规划，要求继续实施国家组织药品集中带量采购，扩大高值医用耗世毕毕材集中带量采购范围，遏制药品、医用耗材价格虚高。及时将临床价值高、患者获益明显的药品纳入医保支付范围，明年实现全国基本医保用药范围基本统一。会议通过《地下水管理条例（草案）》，强调坚持节水优先，明确建立地下水取水总量控制和水位控制制度，确定合理提高地下水水资源税费标准

2、证监会在回复网友关于“尽快明确转板是否要符合分拆的要求”的留言时表示，已进行了深入研究，将适时向市场公开相关制度规则，以保障投资者特别是中小投资者合法权益

3、中国人民银行、香港金融管理局联合公告，香港与内地债券市场互联互通南向合作（债券“南向通”）将于9月24日上线。“南向通”是指内地机构投资者通过内地与香港基础服务机构连接，投资于香港债券市场的机制安排。债券“南向通”跨境资金净流出额上限不超过年度总额度和每日额度；目前，“南向通”年度总额度为5000亿元等值人民币，每日额度为200亿元等值人民币

4、国家网信办发布《关于进一步压实网站平台信息内容管理主体责任的意见》，要求加大违法违规账号处置力度，建立黑名单账号数据库，严防违法搜芹违规账号转世；全面清理“僵尸号”“空壳号”；坚持诚信运营，不得选择性自我优待，不得非正常屏蔽或推送利益相关方信息，不得利用任何形式诱导点击、诱导下载、诱导消费

5、中国保险行业协会发布《商业补充养老保障体系建设（第三支柱养老保险）研究报告》指出，第三支柱养老保险制度的建设涉及政策支持、产品标准和创新、风险管理、运作模式等完整体系设计，期待国家顶层设计长效引导。报告建议，立足于中国国情和防范风险，应综合考虑产品设计经验、风险控制能力、投资管理水平等，对第三支柱养老保险的各类市场参与主体和合格产品设置一定的准入门槛和规范标准

6、据中国地震台网正式测定，9月16日4时33分，四川省泸州市泸县发生6.0级地震，震源深度10千米，震中位于北纬29.20度，东经105.34度。四川省抗震救灾指挥部启动二级地震应急响应

公司聚焦

华自科技（300490）

子公司与宁德时代两项订单取消 不再执行

华自科技9月15日晚间公告，近日，全资子公司深圳市精实机电科技有限公司和宁德时代针对前期两项中标订单签订了《订单变更协议》，因上述项目实施地变更、技术条件变化及精实机电产能档期原因，以上两项订单需作调整。经双方友好协商，中标金额分别为2.3052亿元（含税）、2.5086亿元（含税）的两项订单取消，不再执行。

中证注：

因与宁德时代有合作关系，Wind数据显示，从4月29日到9月15日，华自科技股价从9元最高冲至37.30元，9月15日收盘价为32.74元，累计涨幅高达275.32％。就在投资者满心欢喜之际，华自科技泼来一盆“冷水”。值得关注的是，在多名重要股东减持完毕或终止减持的背景下，华自科技突然宣布子公司与宁德时代两项订单近日取消，引发投资者关注。

长阳科技（688299）

拟投建光学级聚酯基膜项目和锂离子电池隔膜项目

长阳科技9月15日晚间公告，公司拟通过全资子公司合肥长阳新材料科技有限公司投资12.24亿元建设“年产8万吨光学级聚酯基膜项目”。该项目产品主要应用方向为偏光片离型膜和保护膜、MLCC（多层陶瓷电容器）离型膜、新型显示用预涂膜等光学级聚酯基膜。同日公告，公司拟通过全资子公司合肥长阳新能源科技有限公司投资5.91亿元建设“年产5.6亿平方米锂离子电池隔膜项目”。

中证注：

在光学显示、锂离子电池高数亏歌猛进的产业链风口下，长阳科技继续加码。长阳科技是一家高分子功能膜高新技术企业，公司主要从事反射膜、光学基膜、背板基膜及其他特种功能膜的研发、生产和销售，产品广泛应用于液晶显示、半导体照明、新能源、半导体柔性电路板等领域。据了解，偏光片离型膜和保护膜、MLCC（多层陶瓷电容器）离型膜等光学级聚酯基膜，国内目前仍主要依赖于进口。

公告精选

和邦生物（603077）：公司拥有磷矿资源储量3174万吨 目前尚未开采

东华科技（002140）：公司参与了西藏矿业碳酸锂项目的前期有关工作

帝欧家居（002798）：响应限电限产要求 公司广西藤县生产基地暂时性停产

紫江企业（600210）：控股子公司紫江新材料各项财务指标占公司的比重均不高

梅安森（300275）：成为陕西陕煤曹家滩矿业相关项目的供应商

延安必康（002411）：子公司与亿恩科电池签署长期战略合作协议

绿茵生态（002887）：预中标淮河流域生态文明建设示范-叶县灰河生态公园建设项目

川恒股份（002895）：拟投建“矿化一体”新能源材料循环产业项目 总投资预计100亿

鼎龙股份（300054）：拟投资2亿元成立湖北鼎龙先进材料研究院

国城矿业（000688）：拟参设合伙企业 旨在投资新能源产业上游矿产资源和下游材料应用等领域

热景生物（688068）：拟出资设立尧景基因 受让公司外泌体相关基因检测研发项目

安琪酵母（600298）：拟与康合隆成立合资公司 发展婴童零辅食业务

欧菲光（002456）：拟出售子公司南昌光电持有的北汽蓝谷0.94％股份

金开新能（600821）：子公司拟1.52亿元收购木垒县采风丝路100％股权

新日恒力（600165）：月桂二酸项目目前仍列示在在建工程中

升辉科技（300423）：子公司燃料电池发动机通过国家质检机构强制检验

裕同科技（002831）：拟以1亿元至2亿元回购股份

圣湘生物（688289）：实控人拟增持8000万元-1.5亿元

电能股份（600877）：重组事项获有条件通过 股票复牌

创世纪（300083）：拟发行股份购买控股子公司深圳创世纪的少数股东股权 股票停牌

吉电股份（000875）：拟收购中国电力部分清洁能源资产 股票停牌

九华旅游（603199）：嘉润金地拟减持公司不超14.46％股份

恒实科技（300513）：实控人拟减持公司不超4％股份

业绩报告

北汽蓝谷（600733）：子公司前8月销量同比下降22.91％

中国国航（601111）：8月旅客周转量同比下降53.1％

南方航空（600029）：8月旅客周转量同比下降51.23％

金盘科技（688676）：中标2.47亿元新能源采购招标项目

研报集萃

开源证券：风机零部件迎产业机遇

开源证券认为，全球“碳中和”、可再生能源比例提升背景下，风电年新增装机量预期维持高位。国内风机零部件厂商迎来成长机遇，一方面，平价降本压力下，国内风机主机厂商积极推动配套供应链国产化，上游轴承、滚子等核心部件厂商迎切入契机，百亿级市场实现“0”到“1”的突破；另一方面，从需求结构上看，风电海上化、大型化趋势明朗，单机零部件价值量增加、竞争优势强化，头部厂商盈利能力提升。受益标的：恒润股份、五洲新春、豪迈科技等。

开源证券：鼓励检测行业做优做强

开源证券认为，2021年9月，市场监督总局发布《关于进一步深化改革促进检验检测行业做优做强的指导意见》。《意见》的发布有利于解决检测行业创新力、竞争力不强，集约化水平仍有待提高、市场秩序等问题。根据CNCA数据，2020年全国检验检测服务业中，规模以上检验检测机构数量仅占全行业13.11％，但营业收入占比达到77.36％，集约化发展趋势显著。在政府和市场双重推动之下，一大批规模大、水平高、能力强的中国检验检测品牌正在快速形成，检验检测机构集约化发展趋势明显。受益标的：谱尼测试、苏试试验、中国电研、国检集团、电科院、华测检测、广电计量、华依科技、联测科技。