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淋巴细胞亚群分析(淋巴细胞亚群分析多久出结果)

2023-01-05 03:57:48 作者:max
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淋巴细胞亚群分析 什么时间采血

1、淋巴细胞亚群的测定,主要用于了解恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷、重症病毒感染、自身免疫病等患者机体的免疫功能是否处于平衡状态。某种细胞亚群所占百分比过高或过低,都提示存在免疫功能紊乱,但一般情况下对疾病的诊断和鉴别无特异性。

2、CD3+CD4+细胞百分比和绝对数、CD4+细胞/CD8+细胞比值在获得性免疫缺陷综合症(AIDS)患者显著下降,常作为该病诊断、病情观察和预后判断的重要指标。但应注意,CD4+细胞数和CD4/CD8比值的降低也见于一些恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷、器官移植后发生排斥反应以及应用免疫抑制剂治疗的患者。

3、用于白血病细胞免疫表型分析。在某些白血病,如T系急性淋巴细胞白血病细胞CD2、CD3、CD4、CD5、CD8特异性表达;B系急性淋巴细胞性白血病CD19、CD20、CD24阳性表达;慢性淋巴细胞性白血病细胞多表达CD5、CD19、CD20;毛细胞性白血病患者CD19、CD20、CD22呈阳性;NK细胞白血病细胞80%~90%CD16阳性,≥95%CD56阳性。

4、NK细胞测定的临床意义:NK细胞活性下降见于大多数肿瘤患者,特别是中晚期或伴有转移的癌症患者;某些白血病和白血病前期患者,NK细胞活性随病情进展而逐渐降低,以急性期降低最为明显,缓解期患者的NK细胞活性也仍低于正常健康对照;柯萨奇病毒、心肌炎病毒、流感病毒等感染性疾病NK细胞活性下降;某些细菌性和真菌性感染疾病患者也见NK细胞活性低下;免疫缺陷症Chediak-Higashi综合征患者伴有先天性NK细胞缺陷;重症联合免疫缺陷征患者体内T细胞、B细胞、NK细胞的功能同时缺陷。NK细胞活性增高见于多发性骨髓瘤、肺结核等疾病。

T淋巴细胞可分为哪些亚群?有何功能?

T细胞是相当复杂的不均一体、又不断在体内更新、在同一时间可以存在不同发育阶段或功能的亚群,但分类原则和命名比较混乱,尚未统一。按免疫应答中的功能不同,可将T细胞分成若干亚群,一致公认的有:

辅助性T细胞(Helper T cells,Th),具有协助体液免疫和细胞免疫的功能;

抑制性T细胞(Suppressor T cells,Ts),具有抑制细胞免疫及体液免疫的功能;

效应T细胞(Effector T cells,Te),具有释放淋巴因子的功能;

细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells,Tc),具有杀伤靶细胞的功能;

迟发性变态反应T细胞(Td),有参与Ⅳ型变态反应的作用;放大T细胞(Ta),可作用于Th和Ts,有扩大免疫效果的作用;

处女或天然T细胞(Virgin or Natural T cells),他们和抗原接触后分化成效应T细胞和记忆T细胞;

记忆T细胞(Tm),有记忆特异性抗原刺激的作用。T细胞在体内存活的时间可数月至数年。其记忆细胞存活的时间则更长。

其中,Th细胞又被称为CD4+细胞,因为其在表面表达CD4(cluster of differentiation 4)。通过与MHCⅡ(主要组织相容性复合体,major histocompatibility complex)递呈的多肽抗原反应被激活。MHCⅡ在抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APCs)表面表达。一旦激活,可以分泌细胞因子,调节或者协助免疫反应。Tc细胞又名为CD8+细胞,其表面表达CD8.这类细胞可以通过MHCI 与抗原直接结合。

流式细胞分析仪FCM根据淋巴细胞表面标志的不同来检测各淋巴细胞亚群:

淋巴细胞主要包括T淋巴细胞(CD3+),B淋巴细胞(CD19+),NK细胞(CD16+CD56+),

T淋巴细胞

其中T淋巴细胞可进一步测定辅助/诱导T淋巴细胞(CD3+CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD3+CD8+)、CD4+T细胞纯真亚群(CD4+CD45RA+/ CD4+CD45RA+62L+)和记忆亚群(CD4+CD45RA-/ CD4+CD45RO+)、功能亚群(CD28+)、激活亚群(CD38+、HLA-DR+)、凋亡亚群(CD95+)等。

T细胞按照功能和表面标志可以分成很多种类:

1、细胞毒T细胞(cytotoxic T cell):消灭受感染的细胞。这些细胞的功能就像一个“杀手”或细胞毒素,因为它们可以对产生特殊抗原反应的目标细胞进行杀灭。细胞毒T细胞的主要表面标志是CD8,也被称为杀手T细胞。

2、辅助T细胞(helper T cell)在免疫反应中扮演中间过程的角色:它可以增生扩散来激活其它类型的产生直接免疫反应的免疫细胞。辅助T细胞的主要表面标志是CD4。 T细胞调控或“辅助”其它淋巴细胞发挥功能。它们是已知的HIV的目标细胞,在艾滋病发病时会急剧减少。

3、调节/抑制T细胞(regulatory/suppressor T cell):负责调节机体免疫反应。通常起着维持自身耐受和避免免疫反应过度损伤机体的重要作用。调节/抑制T细胞有很多种,目前研究最活跃的是CD25+ CD4+ T细胞。

4、记忆T细胞 (memory T cell):在再次免疫应答中起重要作用。但暂时没有发现记忆T细胞表面存在非常特异的表面标志物,相信随着研究的深入,人们对记忆T细胞将会有一个更深入的了解。

今天检查淋巴细胞亚群

淋巴细胞亚群分析正是检测免疫功能的重要指标

它能反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平,并可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等),对分析发病机制,观察疗效及检测预后都有重要意义

一、什么是淋巴细胞亚群?

人体的免疫细胞包括T细胞、B细胞、NK细胞等。T细胞主要参与细胞免疫,表达CD3抗原;B细胞主要参与体液免疫,表达CD19抗原;NK细胞表达CD16和/或CD56,在机体中不依赖抗原刺激自发地发挥细胞毒效应。其中,T细胞又包括辅助T细胞(Th)和抑制T细胞(Ts),它们分别表达CD4和CD8。

因此,我们可以通过检测细胞表面标记分子来分析不同淋巴细胞亚型的水平。例如,CD3代表总T细胞,CD3高表示总T细胞水平较高。CD4与CD8的比值通常大于1。CD4/CD8增高,表示辅助性T细胞高于抑制性T细胞,说明免疫力好。 CD4/CD8和CD3都高,就说明由于辅助性T细胞增高,所以总的T细胞也增高,是机体免疫力好的表现。那么这个值就越高越好吗?当然不是这么简单,接下来我们分别看看常见检测结果的临床意义。

二、淋巴细胞亚群是如何检测的?

细胞亚群的检测方法种类繁多,大多都是根据细胞表面抗原及其抗体的特异性反应设计的。随着单克隆抗体的问世及各种检测方法的建立,淋巴细胞亚群检测已经在临床上得到广泛应用。目前,流式细胞术(FCM)为淋巴细胞亚群检测的标准方法。流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体,具有分析和分选细胞的功能。通过对细胞表面抗原的分析,流式细胞仪可以用于HLA-B27的检测(强直性脊柱炎)以及血液病/淋巴瘤的免疫分型

我们用于检测淋巴细胞亚群的流式细胞仪是美国BD公司的, 原理是利用不同单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合,再配合多色荧光染料,同时检测几种淋巴细胞的表面抗原,从而将不同功能的淋巴细胞区分开来,并且得到各亚群的相对比例。通过对不同亚群淋巴细胞相对计数、绝对计数以及比率的观察,可以监测感染性疾病 免疫性疾病 及 肿瘤 等疾病状态下机体的免疫状况,从而辅助诊断,判断病情变化。例如:CD4+T细胞膜外CD4分子具有人类免疫缺陷病毒(HIV)识别部位,HIV感染人体后,入侵CD4+T细胞,大量复制,导致CD4+T细胞破坏,数量剧减,功能受损,机体免疫机能严重缺陷,所以,CD4+T细胞检测是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)诊断及病情观察的重要指标。

三、淋巴细胞亚群检测的临床意义

正如上文介绍的,常规监测的淋巴细胞亚群包括T细胞(CD3+)、B细胞(CD3-CD19+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+);其中T淋巴细胞的分类,主要是根据表面分化抗原将成熟T细胞分为CD4+、CD8-和CD4-、CD8+两大亚群,即上文提到的T辅助细胞和T抑制细胞。

通常情况下,T、B、NK三者百分比之和约为100%,在5%的偏差内为正常;CD4+%与CD8+%之和等于CD3+%,在5%的偏差内为正常。下面我们来看看临床上常见的改变有什么意义:1、CD3+细胞数的改变,表示T淋巴细胞总数在外周血MNC中的比例的变化。(1)下降常见于:某些白血病,应用免疫抑制剂,化疗或放疗过程中,长期接受放射性物质,先天性细胞免疫缺陷者,艾滋病,多发性骨髓瘤,传染性单核细胞增多症,某些病毒感染性疾病。(2)增高可见于:重症肌无力,某些自身免疫性疾病,慢性活动性肝炎、系统性红斑狼疮等。

2、CD4+/CD8+细胞比值改变:表明机体细胞免疫功能紊乱。不管是CD4+或CD8+细胞数发生变化均影响该比值。(1)CD4淋巴细胞减少:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。(2)CD8淋巴细胞增多:见于自身免疫性疾病,如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。(3)CD4/CD8gt;2.5表明细胞免疫功能处于ldquo;过度活跃rdquo;状态,容易出现自体免疫反应,见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。(4)CD4/CD8lt;1.4称为ldquo;免疫抑制rdquo;状态,常见于:A.免疫缺陷病,如艾滋病时的比值常显著小于0.5;B.恶性肿瘤;C.再生障碍性贫血、白血病;D.某些病毒感染。CD4/CD8降到1.0以下为ldquo;倒置rdquo;,是较为明显的异常。(5)若移植后CD4/CD8较移植前明显增加,则可能发生排斥反应。

3、NK细胞(CD3-CD16+和/或CD56+)能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用。

四、什么人该检测淋巴细胞亚群?

原则上来讲,在机体的免疫(防御、自稳、监视)功能受损的情况下要考虑检查淋巴细胞亚群,下面列出了一些常见情况:

(1)免疫防御功能受损(反复、严重、多重感染,常规治疗效果不佳)

(2)免疫自稳和耐受功能受损(过敏性疾病、自身免疫/炎症疾病表现)

(3)免疫监视功能受损(肿瘤性改变)

(4)其他特殊情况(血常规中淋巴细胞明显异常、家族免疫缺陷病史、长期使用免疫抑制剂)

近年来,新的细胞表面位点的发现、新单克隆抗体的问世、高新仪器的更新换代等都为淋巴细胞亚群检测的发展提供了可能性,进一步为临床诊断和治疗提供指导和帮助。希望大家也能多多了解和关注淋巴细胞亚群检测,为自己的免疫功能保驾护航。

如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析

简单的概括:

1、先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞;

2、然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞);

3、再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8。

淋巴细胞亚群分析就是封闭抗体检查吗?

不是。目前对淋巴细胞亚群的检测主要有流式细胞术(FCM)、免疫荧光法、AP-AAP桥联酶免疫法等。

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