无外泌体培养基加双抗么外泌体（为什么培养基中要添加双抗）

本文目录一览：

• 1、什么是外泌体
• 2、外泌体是什么？
• 3、原生质体灭活方法有哪些
• 4、失智、脑损治疗大突破！国卫院：「外泌体」应用比干细胞还好
• 5、外泌体多组学01-外泌体初识
• 6、关于外泌体?

什么是外泌体

细胞外泌体-Fresh exosomes

抗衰界的里程碑-外泌体Exosomes

美国抗真老和再生医学学会主席Ronald Klatz恒士说，由于外泌体具有抗炎作用，外泌体引起炎症的可能性几乎是不可能的，与来自其他婴儿的间充质干细胞相比，外泌体的排斥几率也非常低

来自“好细胞”的外泌体携带许多间充质干细胞的再生蛋白，间充质干细胞用于治疗神经发生性疾病的大部分或全部结果归因于来自间充质干细胞的外泌体许多科学家现在认为，通过使用外泌体而不是间充质干细胞，促进再生过程，同时避免或至少减轻排斥和炎症相关问题的风险。

可以说干细胞外泌体是科学界的里程碑，更是细胞中的“爱马仕”

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外泌体是什么？

外泌体是指包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡(30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年，外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现，1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。

外泌体是健康和疾病中细胞间近距离通讯的介质，影响细胞生物学的各个方面。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体，且外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡，参与细胞间通讯，对外泌体的研究兴趣日益增长，无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。

原生质体灭活方法有哪些

原生质体灭活方法有哪些

一、超速离心法，这是目前外泌体提取常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块， 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。

二、过滤离心， 这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性 ，但同样存在纯度不足的问题。

三、密度梯度离心法， 用此种方法分离到 的外泌体纯度 高，但是前期准备工作繁杂，耗时，量少。

四、免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态 的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH 和非 生理性盐浓度会影响外泌体生物活性， 不便进行接下来的实验 。

五、PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9 nature杂志发表了该方法的新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。

六、色谱法，这种方法分离到的外泌体在 电镜下大小均 一， 但是需要特殊的设备 ， 应用不广泛 。

失智、脑损治疗大突破！国卫院：「外泌体」应用比干细胞还好

脑损伤与神经退化疾病就目前科学所知是不可逆的症状，而多数神经退化疾病与脑损伤会引起失智，在台湾估计已经有超过27万的失智人口。近日国卫院使用干细胞的「外泌体」，找到治疗相关疾病的新方法。研究人员指出，外泌体不具有细胞，不会有异体排斥的问题，可说是再生医疗的一大新希望。

近年来，因为高龄、慢性病的原因，脑损伤问题越来越严重。各种程度的碰撞、不正常的生活习惯、高血压、糖尿病、长期的压力及心理疾病等，都是造成脑损伤或退化的可能因素。

不过国卫院细胞与系统医学研究所李华容副研究员团队研究发现，若对大脑受损的小鼠注射干细胞的「外泌体」，观察到受损的神经细胞可以长出突触，神经细胞的数量可以恢复到原本的6成。也就是说，这项技术颠覆了以前「神经受损无法治来喔」的困境。

有生医界贾伯斯之称的维克森林再生医学研究所所长(the Wake Forest Institute for Regenerative Medicine) Dr. Anthony Atala对这项研究表示高度期许：「期待看到这项技术在治疗脑损伤和神经退化疾病的成功发展」。

外泌体 3 大优势，再生效果不输干细胞

什么是外泌体？阳明大学生化所博士张薏雯解释，在培养干细胞的过程中，科学家就在培养基中发现了许多的外泌体在其中，就像是小泡泡一样充满在其中。

过去以为是外泌体只是细胞代谢的废弃物，不过张薏雯表示，外泌体其实有3大好处。

分子小：外泌体的平均大小，大约是在 30 ~ 100nm，属于柰米等级，因为分子小，所以有容易被吸收的特性。 脂质双层：因具有脂质双层的构造，所以与其他细胞容易相容，可对身体带来一些再生修复的作用。 传递细胞间的讯息：外泌体存在的最大功能，就是传递细胞与细胞之间的传令者，举例来说，像是当皮肤细胞出现异常情形时，就会释出外泌体，去跟其他的细胞传达需要救援的讯息，让健康的细胞到有问题的地方进行再生修复的作业。 外泌体不是细胞，好保存、不怕「异体移植」

李华容表示，近年来虽然已经有很多研究指出，干细胞有希望能修复神经系统损伤，但是根据目前的《特管办法》，病人只能用自己的细胞治疗，而且治疗方式要透过手术，还要担心身体对植入的细胞有排斥的问题。

「不过外泌体不是细胞，所以就可以避免身体排斥细胞的风险。」李华容指出。而且，细胞不容易保存，外泌体在这方面更具有优势。

外泌体是对抗发炎利器，未来有望治疗多种「不治之症」

李华容表示，身体的过度发炎反应导致身体损害，不过「抗发炎」就是外泌体的专长。这个研究显示干细胞外泌体较间质干细胞更具有促进组织再生的能力，又能避免细胞植入手术的风险及副作用，对再生医疗带来新的突破。

此系列研究已分别于2019、2020年发表于国际再生医学权威期刊《STEM CELLS Translational Medicine》，并获得国外媒体专栏报导。

李华容表示，目前干细胞外泌体的研究范围虽然仅限于治疗神经相关疾病，但未来可望用于治疗退化性疾病、组织或器官损伤、细胞缺陷、神经退化性疾病、脑与脊髓创伤、中风、学习障碍、巴金森氏症、心肌梗塞、肌肉萎缩症等疾病。

外泌体多组学01-外泌体初识

这是2020年发表在Science上的一篇综述

其中的一幅图比较频繁的出现在各大会议的PPT中：

外泌体的产生过程涉及质膜内陷和包含腔内囊泡( intraluminal vesicles ，ILVs)的细胞内多囊泡体(intracellular multivesicular bodies，MVBs)的形成。通过MVB与质膜融合和胞吐作用，ILVs最终分泌为外泌体，直径为~40-160nm( 类比大小：一个细胞体积约等于10^6个外泌体)：

参与外泌体的起源和生物发生过程的蛋白有：

此外，外泌体生物发生途径与其他与细胞内囊泡运输相关的其他分子途径的交叉混淆了功能研究的解释：

外泌体产生的速率 ：计算外泌体产生的速率受到与任何给定细胞类型的从头产生和外部外泌体摄取相关的动态过程的挑战

外泌体具有以下异质性特征：所有这些特征的结合将有可能导致外泌体的更高层次的复杂性和异质性

围绕外泌体功能的问题主要集中在理解其成分的命运，以及它们在细胞培养系统中在受体细胞上诱导的表型和分子改变

外泌体摄取和分泌途径可能会交叉，随着时间的推移，任何由内源性和循环外泌体组成的细胞都会导致外泌体混合群体的净产生。

与外泌体摄取相关的独特机制和途径，以及外泌体对某些细胞类型的公认特异性，增加了外泌体在细胞间通信中的功能的复杂性，例子：

为了追踪生理条件下外泌体的细胞间交换，我们探索了在小鼠体内涉及各种遗传策略的体内实验：

化疗等治疗干预也可能影响肿瘤的外泌体摄取和随后的生物学反应：

蛋白质被分类为外泌体，可以选择性地诱导受体细胞中的特定信号，以调节发育、免疫反应和疾病的过程。

人类的生殖、怀孕和胚胎发育需要精确、微调和动态的细胞间通信。精液、羊水、血液和母乳都含有具有公认功能的外泌体

外泌体在免疫反应中的作用已被广泛证明。最近的工程外泌体实验表明，外泌体在诱导适应性和先天免疫反应方面具有一定的作用，支持了它们在治疗开发中的效用，并在协调免疫反应应对感染因子或癌症方面发挥了潜在作用。

来自抗原提呈细胞(APCs)的外泌体携带p-MHC-II具有抗原肽的主要组织相容性复合体II(p)]和共刺激信号，并直接将肽抗原呈递给特定的T细胞以诱导其激活。

外泌体可能在代谢性疾病的出现和心血管健康中发挥作用。研究发现，它们可以转移代谢物，并通过胰腺b细胞、脂肪组织、骨骼肌和小鼠和人类肝脏之间的外泌体miRNA交换来转移代谢物，从而促进细胞间的通信。

这些发现支持了癌细胞来源的外泌体可以改变非癌细胞的代谢，包括脂肪细胞和胰岛细胞，从而在功能上促进恶病质和副肿瘤综合征的发展

外泌体生物发生和神经元细胞分泌囊泡调节之间的交集为外泌体和神经退行性疾病发病机制之间的假定联系提供了新的见解。外泌体可参与错误折叠蛋白的清除，从而发挥解毒和神经保护功能，或参与错误折叠蛋白的繁殖和聚集，有效促进蛋白质聚集物的“感染性”，促进疾病进展。

与外泌体在其他疾病中的作用相比，癌症外泌体的研究进展迅速，外泌体与癌症的几个显著特征相关。外泌体影响肿瘤形成、生长和转移、副肿瘤综合征(paraneoplastic syndromes)和治疗耐药性。外泌体在癌症进展中的作用可能是动态的，特定于癌症类型、遗传和阶段。

在大多数研究中，癌细胞来源的外泌体的基质细胞受体是癌相关成纤维细胞(CAFs)和免疫细胞，它们在肿瘤微环境中相互动态调节。

在多种癌症类型中，已经报道了来自癌细胞的外泌体在转移部位引起实质信号应答(parenchymal signaling response)，有效地重塑远处微环境以增强转移, 例如:

从基质到癌细胞的外泌体交换也可以调节癌症的进展和转移：

外泌体也参与了肿瘤微环境的血管生成和细胞外基质重塑，这是肿瘤生长和转移扩散的关键步骤

癌细胞脱落的外泌体可促进对各种化疗药物和抗体的耐药性

外泌体在向病变细胞传递功能性物质方面的特性有利于它们在基础水平和应用水平上作为治疗载体

外泌体存在于所有生物液体中，并由所有细胞分泌，使它们作为微创液体活检具有吸引力，并有可能通过纵向取样来跟踪疾病进展。

外泌体自身或作为药物有效载荷的载体正在积极探索作为治疗药物。与脂质体相比，注射的外泌体可以有效地进入其他细胞，并在外源性给予小鼠时以最小的免疫清除传递功能性货物。

此外，外泌体的治疗应用是有希望的，因为它们已被证明具有良好的耐受性。

关于外泌体?

1、新鲜细胞的再生。外泌体可以使用到受损部位，激活干细胞，促进皮肤细胞新生

2、修复受损细胞。修复受损皮肤细胞，并且储存在皮肤组织中，通过调节皮肤微环境，起到生理修复的效果，而且效果更安全有效

3、防止氧化。外泌体可以激活抗氧化系统，促进抗氧化物质的增加，达到全面抗氧化、保护皮肤的目的。

4、免疫调节。外泌体能抗炎、调节皮肤微环境，还能能调节免疫、促进细胞迁移等，起到改善细胞功能、抗炎、维持组织微环境平衡的作用。外泌体中含有丰富的人体细胞生长因子以及蛋白质，可以激活细胞，从而达到皮肤抗衰老的目的。