骨髓间充质干细胞bmsc（骨髓间充质干细胞表面标志物）

本文的目的是讨论骨髓间充质干细胞bmsc及其相关知识，以帮助你。

干细胞治疗脑梗死可信吗

干细胞是可以应用于疾病的治疗的，只是目前能够应用到治疗的疾病较少，很多疾病的治疗都还处于医学理论研究或临床试验阶段。另外，即使疾病相同，由于每个病人的具体情况有所差异，因此治疗方式也有所不同。

干细胞治疗脑梗死在国内确实有过相应的研究，搜索新闻也可以查看到相关的报道。

中国人民解放军第二零八医院神经介入科研究人员发表论文，旨在观察应用自体骨髓间充质干细胞（BMSCs）介入移植治疗脑梗死的临床疗效和安全性。研究指出，BMSCs移植可以一定程度地改善脑梗死患者症状，提高脑梗死患者的运动和认知功能，自体骨髓干细胞移植是安全有效的。

选择脑梗死患者120例，随机分为干细胞移植组和对照组各60例。对照组给予常规药物治疗，治疗组在常规药物治疗基础上给予重组人粒细胞集落刺激因子150μg皮下注射，待血常规白细胞升高达30×109/L左右后可抽取自体骨髓200 ml。自体骨髓经干细胞分离试剂盒处理获取间充质干细胞。采用自体骨髓间充质干细胞进行干细胞介入移植术，将间充质干细胞超选入脑病变供血动脉。于治疗前、治疗后1个月、6个月进行神经功能FIM评分，应用国际通用的功能独立性评定量表评定其运动和认知能力。

120例患者全部进入结果分析，移植组治疗后1个月、6个月功能独立性评定量表评分显著高于对照组，两组比较差异有统计学意义（P0.01），两组均无不良反应发生。

mesenchymal stem cells是什么意思，间充质干细胞翻译

mesenchymal stem cells的意思是骨髓间充质干细胞

间充质干细胞的翻译mesenchymal stromal cells

骨髓原始间充质干细胞是骨髓基质干细胞，对骨髓中的造血干细胞（HSC）不仅有机械支持作用，还能分泌多种生长因子（如IL-6，IL-11，LIF，M-CSF及SCF等）来支持造血

间充质干细胞【mesenchymal stem cells,MSC】是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。

膝盖疼？6 个方法拯救骨性膝关节炎，总有一个用得上

说起运动， 许多阿姨辈的人可比年轻人勤快多了。很多人退休后就投入到各种运动中，广场舞、爬山、跑步……

虽然运动是勤快了，但很多人感到膝盖越来越疼了，到医院后诊断出了“ 膝关节骨性关节炎 ”。

骨性膝关节炎相信大家都不陌生， 常见于40岁以上的中老年人，女性患者居多。 只要您细心观察，在我们身边就会发现不少这样的人群，他们的主要症状就是膝关节的肿胀、疼痛、活动受限，严重的话还会有膝关节畸形，十分影响生活质量。

那么对骨性膝关节炎保守治疗的方法有哪些呢？

非甾体抗炎药是生活中常见的消炎止痛药，可以控制骨性膝关节炎病情的发展，减轻炎症带来的疼痛。

但是，长期服用非甾体抗炎药会造成上消化道溃疡、出血等严重的并发症 ，使许多合并有上消化道病变的骨性膝关节炎患者不能耐受。

因此，在使用非甾体抗炎药时建议一同服用质子泵抑制剂类（治疗消化道溃疡）药物。 对于不能耐受的患者，建议使用其他保守治疗的方法。

氨糖于1823年被法国的科学家从甲壳动物外科中提取出来，并在之后得到充分的研究。在人体中，氨糖也广泛存在于结缔组织中，如骨骼、软骨、瓣膜、肾小球基底膜和眼结膜中。

氨糖是关节软骨的主要构成成分，随着年龄增长，氨糖不断流失。人们认为补充氨糖，对于骨性膝关节炎有预防、保护修复软骨、抗炎、以及缓解疼痛的作用，在临床上广泛应用于对骨性膝关节炎的治疗。

美国学者最新观点认为，氨基葡萄糖的作用机理尚不清楚，治疗结果的研究中缺少相应的对照，并且很多研究的基金是由药商出资支持的，未能明确其在治疗中的有效性。

但是欧洲学者则认为上述结论的得出部分原因是由于在美国使用的氨基葡萄糖种类繁多且无效，并认为只有处方型结晶型硫酸氨基葡萄糖才具有临床作用，这个观点和我国主流观点一致。选择处方型结晶型硫酸氨基葡萄糖对于轻中度骨性膝关节炎患者症状的缓解，运动能力的改善效果是比较显著的。

透明质酸又称为玻璃酸钠 ，是关节滑液重要的成分，决定着其粘弹性，同时还具有润滑关节，缓冲运动中关节面所受应力、调节关节内细胞功能的作用。

研究发现， 随着年龄的增长，膝关节内透明质酸的含量逐渐下降 ，这与透明质酸分泌生成减少，代谢异常有关。

伴随着透明质酸的减少，其相应的润滑关节，缓冲应力等作用降低，与骨性膝关节炎发生相关。在20世纪60年代，学者提出粘弹性补充法治疗骨性关节炎后，透明质酸应运而生。

关节腔内注射透明质酸的机理还不明确，应该与限制炎症扩散、抑制炎性因子释放、抑制部分酶的活性、缓解疼痛、改善关节功能并延缓骨性关节炎的进程等有关。

虽然关节腔注射透明质酸并不适用于严重的膝关节炎患者以及炎症急性渗出期的患者，少数患者使用后症状可能不缓解甚至加重，但是其治疗轻中度关节炎的疗效还是比较显著的。

这里的激素指糖皮质激素，在人体中有肾上腺皮质中束状带分泌，主要为皮质醇，具有调节体内糖、脂肪和蛋白质代谢的作用，具有强大的抑制免疫应答、抗炎、抗毒和抗休克的作用。

最新的观点认为，关节腔注射长效糖皮质激素（曲安奈德等）有助于缓解关节疼痛、减轻炎性反应、改善关节功能和生活质量。

如果膝关节腔有关节液的渗出，应当先抽吸后在注射40-80mg，与口服止痛药物合并使用效果更佳。需要注意的是，关节腔注射糖皮质激素不建议长期反复应用，每年注射次数不要超过3次。

富血小板血浆（Platelet-rich plasma，PRP），是指外周血经离心、分离、萃取之后，得到的富含高浓度血小板的血浆混合物。

1954年《Nature》杂志首先报道了PRP的概念，之后人们发现PRP中有大量的血小板生长因子，可以促进细胞生长，上世纪90年代后PRP广泛运用于骨科等临床治疗中。

之前也有很多研究表明经关节腔注射后，PRP可以促进关节软骨再生，促进半月损伤修复以及促进韧带重建，同时有较好的止痛效果。

虽然最新的观点认为之前报道的有关膝关节腔内注射PRP治疗骨性膝关节炎的方法中，对于PRP的采集以及技术的使用缺乏统一的标准并存在较大的差异性，但是对于这项新技术的有效性及科学性还有待时间检验。

干细胞是一类具有自我复制自我更新能力的细胞，在一定条件下可以分化为多种功能的细胞。骨髓间充质干细胞（BMSCs）以骨髓组织中含量最多，容易分离，在体外也可以增殖和分化。

所以有学者认为可以通过组织工程修复骨性膝关节炎中的软骨缺损，并且具有营养、抗炎、抗免疫特性，可以直接用于骨性关节炎的治疗。

与PRP一样，最新观点认为BMSCs的采集以及治疗技术缺乏统一的标准并存在较大的差异性，其治疗效果也有待更多的病例研究来证实。

参考文献

1、2019 American College of Rheumatology/Arthritis Foundation Guideline for the Management of Osteoarthritis of the Hand, Hip, and Knee[J]. Arthritis Care Research, 2020, 72(2).

2、Bruyère O, Cooper C , Reginster J Y . A consensus statement on the European Society for Clinical and Economic Aspects of Osteoporosis and Osteoarthritis (ESCEO) algorithm for the management of knee osteoarthritis-From evidence-based medicine to the real-life setting.[J]. Seminars in Arthritis Rheumatism, 2016, 45( 4):S3-S11.

本篇文章

由 张国强团队-陈超医师 撰写

由 张国强主任 审核通过

大鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养

骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells, BMSCs)是骨髓内除造血干细胞之外的另一类非常 重要的成体间充质干细胞，是骨髓造血微环境的重要组成部分，具有支持和调控造血的作用，能被诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞等多种细胞类型。

大鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养技术

  一、实验前准备 

实验开始前，将眼科剪刀、眼科镊子、培养皿，15ml 离心管、移液管、移液枪、枪头等放入无菌超净工作台，以紫外线照射 30min。

1. 选取 SPF 级，体重 100~150g 左右的SD 大鼠，断颈处死。将大鼠置于体积分数为 75%的乙醇中浸泡 5 min。

2. 工作台紫外消毒后，采用通风机通风 3min。以 75%酒精擦拭操作台和双手。

3. 无菌条件下，准备好大剪刀、止血钳、眼科剪刀、眼科镊子、干净培养皿。将大鼠仰卧在超净台内的干净培养皿上。

 二、全骨髓提取  

1. 眼科镊沿腹股沟处提拉大鼠皮肤，眼科剪刀剪开腹股沟皮肤，暴露腿部肌肉，从关节处将大鼠大腿剪下。除去骨表面附着的软组织，置于另一无菌培养皿中。

2. 假如在平时操作中，剪刀不易将骨表面肌肉组织剔除干净，可采用无菌纱布擦拭，可方便的将肌肉组织剔除干净，提高所分离细胞的纯度。

3. 用无菌PBS 浸泡清洗。眼科剪剪断两端骨骺，显露骨髓腔，放置于 10ml 含体积分数为10%胎牛血清的新鲜DMEM 完全培养液的无菌培养皿中，取出 1mL 注射器，用镊子钳起骨头的一端，并用注射器吸取完全培养液冲洗骨髓腔至另一培养皿中，由一段骨髓腔冲出骨髓， 重复 3 次，再反方向冲出骨髓，重复 3 次。直至骨髓腔冲洗液变清亮后停止。

  三、细胞制备

吹打细胞悬液，以便分散细胞，收集骨髓悬液于 15 mL 离心管中，1000 r/min 室温离心5 min。

 四、接种培养  

1. 离心后去上清，用 6mL 完全培养液重悬，轻轻吹打，制成单细胞悬液，转移至 25 cm

2. 培养瓶中，轻轻摇匀;置于 37 ℃、体积分数为 5%的 CO2饱和湿度培养箱中培养。

3. 24 小时后，镜下观察，可见细胞浓度极大，全为球形的大鼠骨髓中的血红细胞，如堆积的沙粒状，悬浮于培养液中并有少量血红细胞相互聚集发生。换液，去除漂浮的血细胞， 以后每两三天换液 1 次，直到增殖达到融合。4. 约 7 天后，倒置显微镜下观察细胞形态与生长情况，可见贴壁细胞数量明显增加，融合达 80%~90%，可进行细胞传代。

  五、细胞传代

待细胞融合至 80%~90%开始传代，吸去培养液，以预热的 PBS 轻轻冲洗后，吸去 PBS。采用消化液消化 1-2 分钟，骨髓干细胞贴壁特性强，比较难于消化，消化液可采用提高EDTA 浓度的方法，镜下可见细胞皱缩变圆，终止消化。本实验的消化液配方可以很好地消化，并不会损伤细胞。除消化液特殊外，其他方法同本光盘内的细胞传代方法。

本实验以 1：2 进行传代。

  六、细胞观察 　

细胞传代到第 3 代时，生长融合后，细胞形态均一，呈长梭形集落样分布，并可重叠生长，细胞纯度可达 95%以上。此时细胞可用于后续实验，或采用表表面标志物进一步验证其纯度：验证标准为CD34 阴性，CD44 阳性。

从本实验结果中可见：全骨髓培养法可分离培养出纯度高、活力旺盛的骨髓间充质干细胞。

  七、注意事项   

1. 缓慢冲洗骨髓腔：

冲洗骨髓腔时为了避免冲起许多气泡损伤细胞，应缓慢冲洗。

2. 严格无菌：

取骨髓间充质干细胞的整个过程都需要谨慎，保证无菌操作

3. 培养基中血清浓度：

过多的血清中细胞因子可以促进细胞增殖，但细胞老化也快。而且一般来说，选择质量好 10%的胎牛血清有利于 MSCs 的培养

4. 原代细胞静置培养：

原代细胞置于培养箱 24～48h 内，应处于静置状态，不宜取出培养瓶观察生长状况，这将使原代分离细胞难以贴壁。

大兔子是没有骨髓间充质干细胞吗

大兔子是没有骨髓间充质干细胞的。骨髓间充质干细胞是一种重要的造血干细胞，它们可以分化为具有血液功能的各种血细胞，如红细胞、白细胞和血小板。骨髓间充质干细胞是人类血液系统中的主要造血细胞，它们可以持续分化，重复产生新的血细胞，维持血液循环的正常功能。但是，大兔子没有骨髓间充质干细胞，而是使用表皮和干细胞来分化出造血干细胞。表皮干细胞和干细胞可以分化为红细胞、白细胞和血小板，但是它们的分化能力不如骨髓间充质干细胞，不能持续分化，也不能重复产生新的血细胞，从而维持血液循环的正常功能。

求问：BMSCs（骨髓间充质干细胞）和MSCs（间充质干细胞）有什么关系呢?或者有什么不同呢?

骨髓间充质干细胞是指来源于骨髓的间充质干细胞，而间充质干细胞是各种间充质干细胞的总称，包括脂肪间充质干细胞，脐带血间充质干细胞等。他们的关系就是：骨髓间充质干细胞是间充质干细胞的一种类型。

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