神经干细胞培养基添加b27（神经干细胞培养基添加b271）

本文目录一览：

• 1、神经干细胞体外培养和建系的基本条件
• 2、动物细胞工程学，什么叫拟胚体
• 3、原代细胞和传代细胞培养有什么区别
• 4、神经元培养时 加了雄性激素脱发去医院挂什么科b27的培养基可以放多久

神经干细胞体外培养和建系的基本条件

取12.5-14天胚鼠取端脑，用胰酶消化成单个细胞，种到培养皿中，培养基使用Gibco公司Neurobasal加B27无血清添加剂还有EGF和bFGF。要分化的话用多聚赖氨酸预包被孔板或者玻片，培养基换Neurobasal+B27+bFGF，两三天后换Neurobasal+B27，然后做染色或者其他实验。

动物细胞工程学，什么叫拟胚体

①拟胚体的形成和特征?

目前从胚胎干细胞诱导分化出神经细胞和胰岛细胞都是90后严重脱发从拟胚体着手的。这两种细胞的分化条件相似，都是分为5个阶段，第一阶段将胚胎干细胞在添加白血病抑制因子(LIF)的培养基中诱导增殖，并维持其未分化状态；第二阶段在无血清的培养基中诱导其形成拟胚体，此后模仿体内胚胎发生的条件，依次改变拟胚体的生长环境，诱导其分化出特定细胞。如图所示：从拟胚体中分离出nestin+细胞后，在N2培养基中添加SHH和碱性FGF诱导分化出Nestw+细胞，去掉碱性生长因子后，在N2培养基的层粘连蛋白和维生素C诱导分化下生成多巴胺类和五羟色胺类神经元，而在N2培养基中添加碱性FGF和B27则生成胰腺前体细胞，再将碱性FGF换成烟碱则培养出胰岛样细胞。

此外，将拟胚体放入有血清培养基中悬浮生长，5天后可以看到其分化形成三个胚层的细胞表型群，并可以看到有自主收缩功能的心肌细胞、平滑肌细胞的收缩区出现，利用这种特征可进一步作单个心肌细胞的分离。Takashi等人还报道将拟胚体培养在星型胶质细胞上可以直接诱导出神经细胞，但未报道此种神经元的类型。以上大量证据表明可以利用拟胚体来研究各胚层细胞是如何从胚胎干细胞分化来的，它们的基因表达程序和调控因子各是什么。

2.典型未分化的小鼠胚胎干细胞克隆成典型的集落状；如果发现细胞团比较扁平或细胞团周围有纤维样细胞，则认为细胞已经开始分化；拟胚体的形态比较好看，圆球形，如果分化方法妥当的话，可以看到分为内外两层，外层为原始内胚层细胞。如果是在STO细胞上形成的拟胚体则早中期呈现半贴壁状态，晚期则呈现悬浮状态。

关于拟胚体的说明，一般认为细胞聚集成团后，首先呈现simple

EBs（简单拟胚体）；而后随着外层细胞的分化，内部逐渐出现空腔，则称谓cystic

EBs（囊状拟胚体）。

原代细胞和传代细胞培养有什么区别

一、定义不同：

1、原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养，也叫初代培养。

2、传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。

二、特点不同：

1、原代细胞培养与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来，故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。

2、当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。

三、生存率不同：

1、原代细胞培养过程相对复杂，培养条件要求也更高。

2、传代细胞培养一般普通培养条件下都容易生存，传代细胞容易增殖。

扩展资料：

1、原代细胞培养是将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。

2、传代细胞培养是当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶，细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。

3、传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行，每一步都需要认真仔细的无菌操作。

参考资料：百度百科-原代培养

参考资料：百度百科-传代培养

神经元培养时 加了干细胞原理是什么b27的培养基可以放多久

放在密封的容器中并置于2-8度冰箱中,可以留1-3个月.不过用前必须检查,从冰箱取出后最好做一次预培养,另外一定要做空白对照.