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干细胞知识

干细胞技术什么时候才能成熟(干细胞技术什么时候才能成熟起来)

max2023-02-09干细胞知识72

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干细胞是如何生产的 生产过程和分类 分化过程转换过程?

看你是要什么干细胞了。一般胚胎干细胞来源是胚胎,准确的说是D7的ICM没分化的部分,拥有全能性。人类胚胎干细胞一般从胎盘和脐带血里提取,这些技术上世纪就已经非常成熟。至于IPSC则是通过基因递送技术将yamanaka cocktail(OKSM)送入细胞中,启动基因表达后就可以在理论上把任何细胞都转化成ipsc。进一步的分化也是类似,可以通过转入相关基因或者用化学方法启动基因表达,诱导细胞分化。工业上分离细胞的方法不太多,FACS用的是比较多的,或者这个技术的各种变体,不过这个技术也有很大的限制。

什么是干细胞工程技术

干细胞工程自上而下分为三个板块:干细胞储存,干细胞药物开发,干细胞治疗。论及人才,这三个板块都是需要的。目前在国内,干细胞储存的技术相对成熟,已建立了数个干细胞存储库;而干细胞药物开发和干细胞治疗领域与国际领先水平还存在一定差距。由于科研重心和舆论压力的因素,此前国内对于干细胞的应用研究未能全面开发,而在乌克兰却形成了良好的研究氛围,EmCell中心即是其中的闪耀的一颗。

什么东西一旦申请专利就可以瞬间成为全球首富?

已经有两个了,但是国家不准申请专利,也不能随便用,只限低剂量小范围使用。一个是干细胞技术,可以淘汰目前绝大多数药品和美容技术,甚至可使人长生不老。因为牵扯到一系列伦理和 社会 问题,甚至法律都需要改变,目前还不能推广,只能在少数医院和少数疾病中实验。其二是美国一个高中生发明的微型核电站,每台只有一辆普通 汽车 大小,但是可以供应一个小区,大约1000户人的日常生活用电,因为原料用的是低浓度铀,所以绝对安全。目前该微型核电站正处于实验之中,一旦达到工业化生产,将立即改变世界能源结构,煤炭石油天然气都将成为淘汰能源。大型船舰,火车,飞机以及重型 汽车 ,都成用上安全便捷的核能发动机,核电将成为世界主要能源。但是因为要改变世界能源结构,目前各油气出口国及电力高低压设备,传输设备,变电设备等一系列工业巨头都面临淘汰或转型,所以美国将该技术只研发不生产,待时机成熟,做好准备后再根据世界形势决定投产时间。

这个问题,无耻的澳大利亚可以给出一个很好的答案:永远不可能有这样的技术。

世界上从不存在可以打败资本的 科技 。无论是什么样的科学发明,无论是什么样的技术专利,都不可能让一个人成为世界首富,最多是让它拥有被世界首富投资的资格。

澳大利亚的某项无耻举动就是最好的例子。

前段时间,澳大利亚的铁矿石一度卡住了中国的资源脖子(澳大利亚降低对中国的铁矿石出口,导致中国铁矿价格暴涨)。但这并不是什么偶然,也不是因为澳大利亚的资源得天独厚,而是澳大利亚用资本精心算计的结果。

世界上目前有两个铁矿区非常的优质,一个是澳大利亚地区的铁矿,一个是位于非洲几内亚的铁矿区,它们产量大、易于开采,可以得到最优质、同时也是成本最低的铁矿石。

客观来说,由于天生的矿石条件限制。能与澳大利亚铁矿媲美的,就只有几内亚铁矿(巴西虽然也是铁矿出口大国,但铁矿的竞争力不如澳大利亚)。可朋友们有没有发现这样一件事情?几内亚铁矿非常好,但为什么几内亚不是世界有名的矿石出口大国呢?

澳大利亚人在这里面扮演了不光彩的角色。就在矿石 探索 者在几内亚发现大铁矿,并发现铁矿的品质非常高之后,澳大利亚就出面欺骗了几内亚政府。澳大利亚打着开发铁矿的名义入股几内亚铁矿,之后故意不开发,也不允许其他美容店一次面部护理多少钱人开放,狠狠地坑了几内亚人。

几内亚铁矿无法开采,澳大利亚自然就是全球最优质的铁矿供应国,这保证了澳大利亚在全球供应市场独一无二的地位,也让它趁机卡了一下中国的资源脖子(中国现在已经积极解决了)。

几内亚铁矿好吧?好呀,但这并不符合澳大利亚的利益,所以它入股之后故意不开发。

所谓的新专利其实也是如此。哪怕科学研究者拿出再好的专利,它也没有办法摆脱资本的控制。连资本的控制都无法挣脱,又怎么会有人能凭借几个发明、专利成为世界首富呢?

况且对于企业来说,新专利其实并不受欢迎,它们更热衷于技术封锁。 年纪大的朋友应该有印象,国产电池崛起之前,国外电池一直高价向世界出售低水平电池。这些生产商有更好的技术,当它们故意不生产,一直用老技术赚钱(直到中国突破了技术关卡,拿出了更便宜的国产货)。

更重要的一点是,科学技术专利 量产。

实验室研发和工业生产其实是两回事,中间其实间隔了更多的技术环节。以现在的复杂 科技 进展水平来说,单一技术专利其实是没有任何商业价值的。

5G技术前段时间在国际上风起云涌,但5G只是一个专利吗?不是的,早在去年1月的时候,全球的5G技术专利数量就突破了1万,到现在更是不计其数。1万个专利啊,这是一个人可以做到的事情吗?哪怕这位天才每天就有1个专利发明,他也要30年才能拿出这些专利。

现在的科学研究早就不是单打独斗的事情了。特别是在涉及工业生产的领域,没有大量的研发投入,没有众多研究人员的配合,独行侠不可能拿出可以量产的科学成果。

放在技术越来越发达的新时代,靠科学技术成为首富永远只能是一个神话传说罢了。

对于中国来说,团队合作式的科学研究对我们有利。中国人自古以来就是团结的,相信中国一定能在新的科学研究形势当中,取得优秀的科学成果。

我提供一个相比较来说还是稍微靠谱一点在未来可能会实现的医学专利,那就是发明治愈癌症晚期的特效药。一旦申请专利,投入生产,财富积累速度绝对是飞速的,而且我都想好了,因为贫富差距大,药品又比较特殊,全球每个国家只开一家店,并且药品不设固定价格,癌症患者无论穷富,必须拿出自己所有财富的50%来换取特效药。而且这个比例,根据财富的多寡上浮或者下降,越富裕的人比例越高最高可到99%,越穷的人比例越低,最低低至1%。

可以这么说,假如世界首富得了癌症晚期,他要想活命,买我一瓶特效药,大概我就立马是世界首富了,何况全球每年得癌症的富豪远不止一个。

到时候,金钱可能对我来说只是个永远花不完的数字。假如我要当美国总统,并且宣告如果美国佬不给我投票,我就永久断绝美国地区的癌症特效药,估计美国财阀们和平民百姓都可能会投给我相当多的选票。

天下有以下10类科研成果一旦拥有其中1项都将是全球首富!

一,治新冠特效药,

二,治癌症特效药,

三,治肥胖特效药,

四,智能机器人老婆,价格在个人平均年收入以下!(计50000元)。

五,能造出个人用二年工资收入买得起的商品房,(计10万元)

六,能造出不用汽油,不用电瓶,会正常行走的轿车,而价格跟汽油车一样!

七,分解酒精的药,酒后开车违法,但吃上该药后,酒精立马归零!开车上路吧兄弟。

八, 人造医用器管,人身体各部位组织像换 汽车 配件一样简单!

九,电可以贮存!而且贮存成本极低。

十,吃饭时可以大鱼大肉,但饭前吃上该药后所有营养归零!特别是碳水化合物!等于没吃饭,以利保持体形。

历史 上能够瞬间成为世界首富的专利并不少,只不过其发明者都主动放弃了而已,比如"互联网之父"——蒂姆·伯纳斯·李,发明了万维网,我们现在所有的互联网框架基本协议构架都是他设计的,后续所有的互联网发展都是基于他的框架(比如为什么网站的开头都是www,http),只不过蒂姆·伯纳斯·李放弃了这个专利权申请,试想一下,现在世界富豪榜多少都是与互联网相关的,如果老李没有放弃这个技术,那么肯定是世界首富。

另一个则是尼古拉.特斯拉(2003年,为了纪念偶像特斯拉,埃隆·马斯克以他的名字命名了特斯拉 汽车 ),这个老兄发明了交流电机,可以说没有他,我们现在用电就不会这么便利,此外他还让无线通信变为现实,如果没有他,或许我们现在还在使用有线的座机,更别谈智能手机了。尼古拉特斯拉一生有700多项专利,不过他都放弃了,长年过着经济拮据的生活。

新技术

当前 社会 上还有什么技术可以让人瞬间成为世界首富呢?我认为以下两种技术都可以。

1、可控的核聚变技术

可以说要想实现共产主义 社会 ,那么核聚变技术就少不了,人类目前的动能来源主要是电力(水电和火电,风电),石油,天然气等,这一切都是依靠自然资源,动能来源终有耗尽的一天(比如石油,火电)或者动能来源不稳(比如水电和风电),虽然说目前也可以利用核电,但只是利用核裂变而已,而不是核聚变技术(原子弹爆炸利用的也是核裂变)。

核裂变的放射性污染很高,而且能量利用有限(这也是核电非主流电力供应的原因),核聚变的放射性污染等环境问题少很多(不会像核裂变一爆发就是无穷无尽的核污染)。而氘和氚之核聚变反应,其原料可直接取自海水,来源几乎取之不尽,因而是非常理想的能源取得方式。如果有人能发明可控的核聚变技术,那么我们就可以获得无穷无尽的动能了。

2、干细胞技术

干细胞技术,又称为再生医疗技术,是指通过对于干细胞进行分离、体外培养、定向诱导、甚至基因修饰等过程,在体外繁育出全新的、正常的甚至更年轻的细胞、组织或器官。

如果干细胞技术成熟,不仅仅现在的各种美容产品可以扔掉,甚至他还可以延长人类的寿命(这是古今往来多少人所梦寐以求的),此外它还可以广泛涉及用于治疗传统医学方法难以医治的多种顽症,诸如白血病、早老性痴呆、帕金森氏病、糖尿病、中风和脊柱损伤等一系列目前尚不能治愈的疾病。

所以说干细胞技术一出,绝对可以再造一个世界首富,它所涉及到的行业是几十万甚至上百万亿的市场。

总结

要想发明的技术可以让人瞬间成为世界首富的,那么必须是革命性的,共性的,这类技术的应用范围要广,受众人数众多,这样成为世界首富的概率才会大。

一发明高能量蛋白胶囊,如鸡蛋般大小,内含人体各种浓缩微量元素、矿物质和维生素,吃一颗到体内后缓慢释放出人体所必需的高能量,再喝上一两杯水就能支持一到二天能不饿,既不用天天三餐都吃,而且人还不会发胖,是不是很爽呢?不用再花大量时间买菜做饭,外出时不用带大量的食物,人们可以节约很多时间,做自己喜爱的事……发明这种食物胶囊的人,数钱数到手抽筋,睡梦都是在数钱,哈哈哈!

二延缓人体细胞衰老的基因药物,用药后直接慢慢的改变自身衰老基因细胞。大家现在都是工作到六十岁就退休了,年老体弱,力不从心了,而服用这种药后,七十岁还活蹦乱跳,八十岁找机会谈个恋爱,九十岁来场说走就走的 旅游 ,一百岁同聚四世同堂,一百二十岁才和世界说拜拜!这不但是我们的梦,也是无数科学家的终身梦想,谁发明了这种延缓衰老的着,钱是想要多少有多少!

三是阻止人体癌症细胞病变的基因疫苗,注意,我说的是阻止病变而不是治愈哦。大家想想人体患上癌症有多受苦:身体上受到无尽疼痛的折磨,精神上受恐惧的煎熬,不论化疗也好放疗也好,体内所受的痛是苦不堪言,治愈率还低,而且金钱花费巨大,一人患癌,全家遭殃,到头人财两空。当人们注射这种能改变人体癌症病变的疫苗后,细胞不再会发生癌变:没有了癌症,人们身体不用再受患癌时各种苦痛折磨,人们生活会更幸福。这种药是无价之宝吧?谁不想要呢!

可控核聚变装置。一旦实用。煤炭 石油 核裂变 太阳能 等等传统能源行业会消声觅迹。人类会有用之不尽的清洁能源。专利持有者也会成为地球首富。如果我有此项专利我会放弃它 让全人类共享 用不了几年时间 地球上处处是碧海蓝天 科学技术突飞猛进的发展 人们生活水平极大提高 中东土豪不再炫富 美元帝国坍塌 由于争夺能源引发的战争不复存在 。真正实现安居乐业 。

这样的东西简直不要太多。

所有人类生存、生活所需要的资源,维持人类 健康 的、提高人类生活品质的、满足人类各种欲望的各种方法和物质,只要能申请专利,并被人垄断来收取专利费,都可以瞬间暴富。

但人类 社会 的公共规则绝不能允许这样的事发生。后面我会谈谈哪些“发明”是不能申请专利的。

这里聊聊我们当前生活中普遍运用的一项发明,如果我们被迫交付专利使用费,那专利持有人妥妥的瞬变全球首富。

你一定猜到了,那就是 二维码。

一般认为,二维码(也称“快速反应码”)是在1994年就被日本公司Denso Wave的腾弘原发明的,它是用某种特定的几何图形按一定规律在平面(二维方向上)分布的黑白相间的图形记录数据符号信息,这种技术逐渐被人们用来做数据识别和处理。

发明是日本人发明的,但真正开花结果、广泛应用却是在我们中国。2011年,凌空网徐蔚申请注册了“二维码扫一扫专利”,并将这个消费级的专利授权给其他公司使用,徐蔚赚取了多少专利费不得而知,但想来不会太多。八年前任谁也想不到移动支付如今这样地渗透和颠覆我们的生活。

如今中国的移动支付规模已经极其庞大了,据艾媒咨询的数据,2018年中国移动支付交易规模达到277.4万亿元,较2017年增长136.7%,2019年第一季度交易规模达83.9万亿元。(数据和图表来自艾媒网,在此致谢)

这样的支付规模下,我国民众使用二维码的次数估计一年不少于一万亿次!如果每次收一分钱,就是100亿!如果收一毛钱,就是1000亿!

要是有人持有这样的专利并收费,秒变亿万富翁是不是?

据说日本二维码发明者曾试图向国人收费来着,但技术早已不是原来的技术了,最终不了了之。

顺便科普一下,下面这些“发明创造”是不可以申请专利的:

1. 违反法律、 社会 公德或妨害公共利益的发明创造(比如赌具、毒具、武器);

2. 对客观自然现象的科学发现(比如某种自然规律);

3. 智力活动的规则和方法(比如 游戏 规则和方法、说明、计算口诀);

4. 疾病的诊断和治疗方法(主要为了防止垄断以及人道主义和 社会 伦理的考量);

5. 动物和植物品种;

6. 用原子核变换方法取得的物质(涉及国家、公众重大利益,决不能被个人或集团垄断);

7.对平面印刷品的图案、色彩或者二者结合作出的主要起标识作用的设计。

如果这些都能申请专利,人类 社会 岂不是倒退回弱肉强食的原始丛林?少数人暴富却剥夺了多数人的天然权利,文明世界的 社会 伦理决不能容许。

可以带来天量财富的专利很多,无不是具有巨大市场需求,能够改变当前格局的发明。

假如当年特斯拉申请了交流电专利,他大概率能够成为世界首富,而不至于落到悲惨境地。

站在2020年来讲,财智成功认为如下专利足以支撑一个人成为世界首富:

一、一款可以彻底治愈癌症的药物

如今癌症越来越多,一些病患为了治病救命不惜花费数十万元。如果有一款药物问世,可以应对多种癌症,疗效极佳,一瓶彻底治愈,那么一瓶5万元也会有无数人抢着买,几年下来世界首富的目标就能实现了。

二、大幅改善人体机能、延长寿命的基因药物

在科幻小说中我们经常会看到基因药剂,注射一针就能变成蜘蛛侠一样的超人。基因很神秘,既是枷锁,又是宝库。假如有一天我们能够破解基因的所有秘密,可以使用药物定向改变基因,那么批量制造超人、延长寿命不再是梦想。

对于已经垂垂老矣的亿万富豪们来说,拿出几个亿购买,相信没有问题。

三、超能电池

设想一下,一块巴掌大的电池,充电只需一分钟,可以支撑一辆电动 汽车 在高速上不停奔跑一千公里。不管严寒酷暑,性能不会发生明显变化,几年下来也不会衰减,燃油 汽车 时代迅速结束。

四、微型可控核聚变专利

能源是人类生存和发展的关键,微型可控核聚变意味着无限能源成为可能。汽油不需要了,火力发电厂不用了,燃煤不用了,世界能源结构彻底改变。

说起这些特别的专利之前,想先和大家分享几个因为没有申请专利而错失亿万富豪的例子。

第一位叫做特斯拉,可能更多的人听见这个名字想到的是埃隆·马斯克打造的电动 汽车 ,不过这也是个人名,全名叫做尼古拉·特斯拉,可以说他是人类 历史 上最为杰出的科学家、发明家。

他发明了的交流电机,让用电彻底实现了普及化,发明了特斯拉线圈,还成就了今日的无线通信技术,甚至无线充电能够成为可能也是拜这项技术所赐。

我们今日用的智能手机里面的基础功能,这位发明家早在100多年前就提出来了,如果他对于这些技术都申请专利,那么我们每天都要支付给他几十、上百亿,想想他会成为怎样的巨富。

还有一位叫做蒂姆·伯纳斯·李,他发明了互联网,目前互联网的框架协议都是他设计出来的,不过他也没有申请专利。

如果上面两位老兄都申请了专利,那么亚马逊的贝索斯,脸书的扎克伯格还有咱们的马云恐怕财富会分分钟被碾压。

说到这里其实我们也看到,要真的想要凭借一项专利就当上全球首富,这项专利一定要和所有人的生活密切相关,就像电、手机和互联网我们所有人都离不开一样。

那么现在就给大家介绍两项新技术,如果真的申请专利并且投入使用,那一定可以成为世界首富。

一、 干细胞技术

这项技术也被成为再生医疗技术,核心是通过从人体内提取干细胞,在体外的培养液中进行专门培养,再通过基因修饰技术去掉里面的缺陷基因,再通过专门的诱导生长技术,培养出人类所需要的各项器官等等。

我们经常听到因为器官坏死需要移植器官,但是因为能够适配的器官很少导致病人不能得到有效救治的事情,但是如果有了这项技术,我们自己就可以从体内提取干细胞然后培养出我们需要的器官,如果技术成熟的话,今后的医疗费用还有可能大大降低,这样就能够拯救大多数人的生命。

另外,这项技术还可以用于美容领域,通过修正体内基因让人人都能拥有更好的面容和身材,相比于传统美容,风险小,而且一次手术永久有效还没有副作用。

这项技术甚至可以改变人类的长寿基因,提高人类的普遍寿命,可以说是功德无量。

不过因为这项技术还不成熟且存在道德伦理风险,所以还在实验阶段,现在就等能够将它推向成熟化、市场化的专利技术。

二、 可控核聚变技术

我们目前使用的能源主要还是煤、石油、天然气等这些化石燃料,然而这些燃料总有耗尽的一天,而且像煤、石油燃烧会对空气造成污染。寻找可持续的清洁能源一直是人类的终极目标,虽然现在不少国家都在发展核电技术,但是如果出现了像日本福岛核电站核泄漏事故,危害就会非常大。

而可控的核聚变技术就提供了一种新的可能,核聚变避免了向核裂变那样产生核污染的可能性,而且因为反应材料主要为氘和氚,它们是氢元素的同位素,所以可以取自海水然后进行有效分离,而地球上的海水可谓取之不尽,目前关键就是如何将聚变控制在人类需要的程度内,所以谁能将这项技术开发出来推向市场,也可以一夜成为世界首富。

不过这两项技术都十分特殊,即使开发出来,也要获得国家和国际 社会 认可,所以过这关也很重要哦!

干细胞技术到什么阶段了,现在有没有必要在汉氏联合存储干细胞呀?

国内干细胞技术还在发展阶段,但是汉氏联合干细胞在国内相比较其他的一些机构来说,技术体系更成熟,存储及服务流程也更完善,毕竟在这一领域也努力十几年了,国内国际都比较知名,现在家里大部分都是一个孩子,这个干细胞还是很有必要存的。 百度上面有这方面的资料。

干细胞培养的几个概念

金仁桃 章孝荣( 安徽农业大学畜牧水产学院 合肥230036 ) �� 自Evans和Kaufman(1981)从延迟着床的胚胎中分离出小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞)以来,ES细胞一直备受人们的关注��〔1〕�。1998年,由基隆公司资助的汤姆森研究小组在《科学》杂志上发表了关于人的ES细胞建立等一系列工作之后,基隆公司的股票更是狂升了6倍;1999年、2000年,干细胞研究两度被美国《科学》杂志推举为21世纪最重要的研究领域;1999年,美国《科学》杂志还将干细胞研究评为当年世界十大科学成就之首。由此足以显示干细胞的魅力,而干细胞之所以如此吸引人们的注意,主要是因为干细胞是一种全能性的细胞,可以自发分化形成多细胞结构,即胚胎小体(embryonic body,EB)。EB含外胚层、内胚层、中胚层三个胚层,胚胎小体继续分化可以形成多种细胞类型,包括血细胞、内皮细胞、肌细胞及神经元等。另外ES细胞在动物克隆生产、转基因动物生产、疾病研究模型及药物生产等诸多方面有着诱人的前景。本文主要就ES细胞在克隆动物生产的应用加以阐述。 �1 ES细胞克隆的理论依据 � ES细胞是从早期胚胎内细胞团(inner cell mass, ICM)和附植后原始生殖细胞(Primordial germ cells, PGCs)分离出来的一种细胞,它具有全能性(totipotenty)或多能性(pluripotency),可以发育为任何一种组织或器官的前体细胞,再由该前体细胞发育成功能细胞。正常的ES细胞可分化为两个子代干细胞,也可以分化一个子代干细胞和一个功能细胞。 这种分化是由干细胞内源性调控(主要是受干细胞内结构蛋白和多肽因子调控)和外源性调控(主要是由周围组织细胞及细胞外基质等调控)所影响。而最近Amato Giaccia 发现氧含量操纵干细胞的分化,为人们进一步利用干细胞提供了有益的提示。另一个重要发现就是Andrew E. Wurmser等发现成熟组织的干细胞仅仅是通过与现存细胞融合而形成其他组织,而非制造新细胞,那么对成熟组织的干细胞利用,将趋于更加谨慎��〔2〕�。这也更加提升了ES细胞的作用。 �ES细胞另外一个特点是它像正常的体细胞一样可以在体外进行增殖、克隆、冷冻、保存而保持不分化。这样就可以为人们提供大量的可利用的ES细胞。如每只实验动物一次可提供5000~6500个PGCs,然后在体外可培养成类ES细胞。现在人们可将ES细胞体外培养传至40~60代而不分化,而这样大量的细胞就为我们利用它奠定了基础。 �ES细胞具有可操作性。在体外人们可以对其进行遗传操作选择,如转基因、基因打靶、配合基因诱捕等一系列技术,再结合核移植技术,生产出人们所希望的动物。 �2 ES细胞克隆的可行性 � 克隆技术的原理是将供体细胞核移入去核的卵母细胞中,通过激活使其重新编程发育,从而产生新个体。目前体细胞克隆相对于ES细胞来说,存在有两个问题:一是体细胞在体外培养易变异。为避免这一缺点,目前较多使用新分离或传代较少的细胞。二是关于选用何部位的细胞。目前人们已使用了乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管细胞、皮肤成纤维细胞、子宫上皮细胞、肌肉细胞、支持细胞、肝脏细胞、耳成纤维细胞、初乳中乳腺上皮细胞等。但到目前为止,还没有发现何种体细胞是最适合于核移植的,所用作核移植的细胞有的来自于胎儿,一般是成纤维细胞,也有来源于成体动物的。这主要是因为虽然从理论上讲,机体中的每一个细胞都是从受精卵分裂分化而来,而在机体内通过半保留复制方式,DNA信息被完整的传递下来,但从一个受精卵到机体的亿万个细胞,有些细胞的个别基因可能发生不可逆的丢失或重排,使用这样的细胞作核供体,就无法保证信息的完整性,这也可能是目前细胞克隆中普遍存在的克隆效率低,出生后的死亡或异常的原因之一。ES细胞的核移植虽然也同样需要在去核的卵细胞内重新编程,但是相对于体细胞克隆效率低、妊娠期间易流产来说,ES细胞的克隆效率要高得多,而且ES细胞的重新编程要容易得多。这也正如人们所假设的目前存活的克隆个体所用的供体核大多是源于动物组织的成体干细胞的核而非最终分化的细胞的核〔3〕�。 �随着对ES细胞研究的深入,人们已经在多种动物得到了ES细胞核移植的后代。Teruhiko Wakayama等采用长期传代(30代以上)的小鼠ES细胞克隆出了31只小鼠,其中14只存活〔4〕�; Campbell (1996、1995)分别将绵羊、山羊的类ES注射入去核卵母细胞,获重构胚,经核移植有活羊出生��〔5〕�。Michelle Sims和N.L First(1993)将培养6~101d牛的ICM细胞核移植到去核卵母细胞,卵裂率为70%,囊胚率为24%,经胚胎移植有13头妊娠,出生了4头牛犊��〔6〕�; Stice(1996)将牛的类ES细胞进行核移植,得到重构胚并移入受体牛子宫,发育至45天��〔7〕�;Cibelli利用转基因技术得到生殖系嵌合的牛;Shim(1997)和Piedrahita(1998),利用猪的PGCs建立多能干细胞系,并得到嵌合体猪。 �3 ES细胞克隆的意义 � ES细胞的核移植最基本的意义就在于,如果通过核移植能够产生完整的后代,而且具有和亲代一样的遗传特性,那么它就恰恰证实了ES细胞是具有全能性的一种细胞。ES细胞克隆和体细胞克隆一样,通过得到的大量具有亲代一样遗传特性的供体细胞,再利用核移植技术,可以提高优秀个体的繁殖效率,迅速扩充优秀个体的种群,为畜牧生产作出极大的贡献。 对于珍稀品种或濒临灭绝的物种来说,该项技术提供了一种可以挽救珍稀或濒危物种的机会。利用ES细胞水平上的基因操作相对于受精卵水平上的转基因更加容易,可以得出人们所需求的转基因动物,然后再运用核移植技术,即可得到大量的具有此基因表达的个体,同时这也是创造新物种的绝好机会。由于ES细胞具有自发融合的性质,由此可在细胞水平上操作, 完成新物种的创造,而这种新物种可能是自然交配无法得到的。人们曾将牛、绵羊及人的GH基因先后导入小鼠基因组,得到的转基因小鼠在快速生长期生长速度为对照组的4倍。另外,利用ES细胞核移植还可以一次得到大量同质的后代,为生物学研究提供了很好的模型。 4 目前存在的问题 � 由于ES细胞的发现至今也只有20多年的历史,因此人们对它的了解有限,限制了对它的利用,目前就干细胞的核移植来说,主要存在以下问题: �4.1 核移植技术本身还有许多理论有待完善,目前核移植的效率还很低,而对于像重构胚的发育与着床,核质互作与协调等理论还需要人们作进一步的深入研究。 �4.2 ES细胞建系的技术还不成熟。目前广泛使用的饲养层是小鼠成纤维细胞无限系(STO)或小鼠胚胎成纤维细胞(Primary Mouse Embryo Firbroblasts, PMEF)制备而成,主要是利用其细胞分泌的生长因子FGF和抑制细胞分化的因子LIF共同作用,保持干细胞在体外克隆而不分化,然后加入一些其它的物质。即便如此,目前其建系的效率仍不是很高,特别在国内,能够得到大家畜的类ES的都不是很多,而且得到传代次数较少。人们目前尝试了使用其它的培养基,如大鼠成纤维细胞条件培养基、山羊输卵管上皮培养基、绵羊输卵管上皮培养基、绵羊子宫上皮培养基、山羊子宫上皮培养基、牛的颗粒细胞培养基、牛子宫成纤维细胞培养基、胎牛的睾丸、肾、肝成纤维细胞培养基。Meinecke Tillmann(1996)发现胎牛的成纤维细胞对绵羊的ICM和ES细胞增殖有利。而Piedrahitat等采用猪胎儿成纤维细胞和上皮细胞作为饲养层,结果失败。Strojek等(1990)认为,初步培养囊胚时,使用猪子宫成纤维细胞饲养层可以促进囊胚的贴壁和ICM克隆的形成。此时若用STO作饲养层,尽管猪囊胚可以附着在STO上,但ICM不增殖,但以后的传代只需要STO进行。可见对于饲养层的选择,目前仍有待人们的进一步发现。对于ES细胞的建系,人们还发现,ES细胞必须保持一定的浓度,这是因为ES细胞能够从培养基中摄取营养的同时,也要向培养基中排出自己的分泌和代谢产物和其它一些物质,这些分泌物中,有促进细胞生长的物质,有人就称之为促克隆生长物质。 �ES细胞应用范围是很广的,对于核移植的应用仅是其一部分。例如,利用ES细胞的全能性,进行定向诱导分化,再在细胞水平上进行药物的测试,可以极大提高药物的检测进度;利用ES细胞可建立人类遗传病研究的动物模型等。可以说,对于干细胞的研究方兴未艾。 � 参考文献 �〔1〕Evans M J, Kaufman M H. Establishment in Culture of Pluripotential Cells from mouse embryos〔J〕. Nature, 1981, 292(9): 154~156 �〔2〕Andrew E. Wurmser, Fred H.Gage. Cell fusion causes confusion〔J〕. Nature, 2002,416,485~491 �〔3〕Konrad Hochedlinger, Rudolf Jaenisch. Monoclonal mice generated by nuclear transfer from mature B and T doner cells〔J〕. Nature, 2002,415,1035~1038 �〔4〕Wakayama T, Rodriguez I, Perry AC, et al. Mice cloned from embryonic stem cells〔J〕. Proc Natl Acad Sci USA, 1990,96(26):14984~14989 �〔5〕Campbell.K.H.S, Mc whiir,J, Riechie.W.A, et al. Sheep cloned by nuclear transfer from a cuctured cell line〔J〕. Natrue,1996,38(7):64~66 �〔6〕Sims M.M, FirsA NI. Production of fetuses from totipotent cultured bovine inner cell mass cells〔J〕. Theriogenology, 1993,39:313 �〔7〕Stice SL, strolchonko NS.Pluriopotent bovine embryonic cell lines directed embryonic development following nuclear transfer biology of Reproduction〔J〕. Theriogenology, 1996,54:100~110

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